瘢痕疙瘩间充质干细胞的分离与生物学特性鉴定

【作者】 朱晶晶； 王达利； 邓呈亮； 王波； 余丽梅；

【机构】 遵义医学院附属医院烧伤整形外科；

【摘要】 目的探讨人瘢痕疙瘩中是否存在多能间充质干细胞,并对其进行分离培养及初步研究其生物学特性。方法以人瘢痕疙瘩为研究对象,用酶消化法进行分离,通过传代培养进行筛选;流式细胞技术检测细胞表面标志CD29、CD34、CD44、CD45及CD90的表达及细胞周期;免疫细胞化学法检测细胞CK19、波形蛋白的表达;逆转录多聚酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞Oct4的表达;实验同时对该细胞进行多向诱导分化能力鉴定。结果从瘢痕疙瘩中分离出间充质干细胞,连续传代培养后,形态较为均一;细胞群中有67.66%的细胞处于G0/G1期,增殖期的细胞占32.34%;流式细胞仪检测细胞表型分析表明,该细胞均高表达CD29、CD44、CD90等间充质干细胞表面标志、不表达CD34、CD45等造血干细胞表面标志;免疫细胞化学法检测间充质细胞标志物波形蛋白表达阳性、上皮细胞标志物CK19表达阴性;RT-PCR法检测多能干细胞标志物Oct4表达呈阳性;诱导分化实验证实该细胞可向成骨细胞、软骨细胞和成脂细胞分化,具有多向分化潜能。结论人瘢痕疙瘩内存在间充质样干细胞,这种干细胞可能在瘢痕疙瘩发生中发挥重要作用。更多还原