恶性疟/间日疟LDH胶体金分型检测试剂研制及临床试用评估

【作者】 郝芬； 李诗敏； 梁敏瑶； 徐伟文；

【机构】 南方医科大学生物技术学院； 中山大学达安基因股份有限公司；

【摘要】 疟疾是严重危害人类健康的虫媒传染病,广泛流行于热带和亚热带一些发展中国家。恶性疟原虫和间日疟原虫是最为常见的型别,早期快速诊断及鉴别诊断对于疟疾的诊治具有十分重要的意义。本研究采用免疫胶体金层析法对人静脉血中的疟原虫循环抗原乳酸脱氢酶(LDH)进行检测,旨在为恶性疟原虫感染、间日疟原虫感染或二者混合感染的早期诊断提供快速、简便及廉价的检测工具。试剂条含有被事先固定于NC膜上的测试区T1的恶性疟原虫LDH种特异性的抗体、测试区T2的间日疟原虫LDH种特异性抗体和质控区(C)的相应抗体。通过对主要原材料进行研究,制定本试剂的主要原辅料的制备、质控标准;通过对生产工艺关键点进行控制,确定相关的质控点;通过企业参考品及试剂自带质控对成品试剂进行质量控制。经检测:本试剂最低检出量不高于原虫感染度200虫/μl;精密性研究结果表明本试剂批内和批间重复性好,反应结果一致,显色度均一;阴阳性参考品符合率均达到100%;稳定性研究表明,本试剂在4-30℃可以稳定保存18个月,开封后有效期为1小时。用该试剂对1072例临床标本(其中恶性疟238例,间日疟257例)进行检测,结果与疟疾检测的金标准显微镜检法进行盲法比对,经统计分析,pf阳性符合率为98.3%、阴性符合率为97.5%、总符合率为97.7%、kappa值为0.934;pv阳性符合率为98.4%、阴性符合率为98.8%、总符合率为98.7%、kappa值为0.964;总阳性符合率为99.0%,总阴性符合率为96.4%,总符合率为97.6%,总的kappa值为0.951,并且不受乙型肝炎、丙型肝炎、结核及类风湿因子的干扰。研究结果表明本试剂可靠、准确、安全、简便、稳定,具有较高的临床应用价值。更多还原