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发光杆菌杀虫相关基因plu1971的克隆、表达及血腔杀虫活性
【作者】 李梅； 潘子强； 刘文利； 陈永强； 罗清荣； 沈志华；
【机构】 电子科技大学中山学院化学与生物工程学院；
【摘要】 发光杆菌Photorhabdus luminescens是存在于昆虫病原线虫肠道内的一类细菌,该类细菌与线虫组成线虫一共生菌复合体,具有较强的杀虫活性,在复合体中起关键作用的主要是共生菌。这类细菌进入昆虫体内后,分泌杀虫毒素,在短时间内使昆虫致死。plu1971是发光杆菌的一个ORF,其功能未知,但其推衍的氨基酸序列与耶新氏菌(Yersinia pestis)鼠毒素Ymt蛋白(murine toxin Ymtprotein)有59%的相似性,为了进一步研究该基因功能,本文利用PCR技术从发光杆菌P.luminescenssubsp.akhurstii YNd185基因组中扩增plu1971全基因进行克隆,然后连接到表达载体pET32a~+,构建重组的表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,利用表达载体的His Tag蛋白试剂盒对表达产物Plu1971进行纯化。将纯化蛋白Plu1971注射大蜡螟(Galleria mellonella)进行血腔生物测定,结果显示:血腔注射2ug的Plu1971蛋白有较强的血腔杀虫活性(P<0.01)。
- 【会议录名称】 第五届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会论文摘要集
- 【会议名称】第五届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会
- 【会议时间】2013-11-22
- 【会议地点】中国广东广州
- 【分类号】S476
- 【主办单位】中国微生物学会微生物资源专业委员会、国家微生物资源平台