利多卡因预处理对LPS诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白5的影响

【作者】 曾悦翔； 徐道妙；

【机构】 中南大学湘雅医院ICU；

【摘要】 目的观察利多卡因预处理对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白5(Aquaporin-5,AQP-5)的影响,并对其可能机制进行初步探讨。方法原代培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,随机分5组(n=6):1.空白对照组;2.溶剂对照组;3.LPS组;4.Lido+LPS组;5.Lido组(Lido终浓度为200μg/ml),其中第4组据Lido浓度不同分三个亚组:A组(Lido终浓度为2μg/ml);B组(Lido终浓度为20μg/ml);C组(Lido终浓度为200μg/m1),相应组于LPS10min前加入Lido,4h后ELISA检测各组细胞cAMP含量及上清液中TNF-α含量,RT-PCR及western blot检测各组细胞AQP-5mRNA及蛋白表达水平。结果 1.细胞上清液ELISA显示,与空白对照组相比,LPS组及Lido+LPS各组TNF-α水平明显升高(P<0.01,P<0.05);与LPS组比较,Lido+LPS各组明显下降(P<0.01),且A、B、C各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2.RT-PCR及western blot检测显示,与空白对照组相比,LPS组及Lido+LPS各组下降(P<0.0 1,P<0.05);与LPS组比较,Lido+LPS各组AQP-5mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.01),且A、B、C各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。3.各组胞内cAMP含量显示,与空白对照组相比,LPS组及Lido+LPS组胞内cAMP含量下降(P<0.01,P<0.05),与LPS组比较,Lido+LPS各组胞内cAMP含量升高(P<0.01),且A、B、C各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利多卡因预处理可呈浓度依赖性的上调LPS诱导后肺泡Ⅱ型上皮细胞AQP-5的表达,其机制可能与抑制TNF-α释放及增加胞内cAMP表达有关。更多还原