镉恶性转化16HBE细胞中DNA修复通路相关基因表达和序列的变化

【作者】 雷毅雄； 周志衡； 王敏； 魏莲；

【机构】 广州医学院公共卫生与全科医学学院；

【摘要】 背景:镉(Cadmium,Cd)及其化合物被国际癌症中心(IARC)确定为人类致癌物,但其致癌的分子机制尚不完舍清楚。目的:探讨氯化镉诱发人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化过程中DNA修复通路相关基因mRNA和蛋白动态变化的规律及其序列突变情况。方法:用反转录-聚合酶链反应(PT-PCR)和免疫组织化学(SP法)检测非转化16HBE细胞、氯化镉转化16HBE细胞系不同阶段(第5、15、35代细胞及成瘤细胞)的7个DNA修复通路相关基因mRNA和蛋白的表达情况;并对表达异常基因的部分外显子进行序列测定,分析各外显子的突变情况。结果:随着CdCl2对16HBE细胞转化代数增加,hMSH2、ERCC1、XRCC1和hOGG1基因mRNA和蛋白表达水平表达逐渐减弱,与非转化16HBE细胞相比,CdCl2恶性转化第35代细胞及转化细胞接种裸鼠成瘤细胞的hMSH2、ERCC1、XRCC1和hOGG1基因mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的降低(P<0.05)。而MGMT基因、hMLH1基因和ERCC2基因mRNA和蛋白表达水平在氯化镉恶性转化16HBE细胞过程中未见显著性差异(P>0.05);测序结果显示非转化16HBE对照细胞各基因外显子序列均与Genbank报道的序列一致,但在镉转化成瘤细胞中,发现hMSH2基因exon8、exon9、exon12,ERCC1基因exon4,hOGG1基因exon7的序列出现突变,所有的突变均为移码突变。其余在氯化镉恶性转化16HBE细胞过程中异常表达的DNA修复相关基因的各外显子序列与对照组相比未见差异。结论:氯化镉的分子致癌机制可能与部分DNA修复通路相关基因的表达下调和突变有关。更多还原