西瓜NBS类型RGA的克隆与分析

【作者】 薛莹莹； 孙守如； 孙德玺； 邓云； 朱迎春； 刘君璞；

【机构】 中国农业科学院郑州果树研究所； 河南农业大学园艺学院；

【摘要】 <正>抗病基因同源序列(Resistance gene analog,RGA)是一种存在于植物基因组当中的与至今已分离的植物抗病基因某些保守序列有较高同源性的DNA片段,一些RGA与抗病基因密切连锁,甚至就是抗病基因的一部分。因此,分离西瓜RGA不仅有助于筛选西瓜各种抗病基因的分子标记,而且通过对西瓜RGA的结构、表达和调控的研究,将有助于深入阐释西瓜的抗病机制。20份西瓜材料由中国农业科学院郑州果树研究所国家种质资源西瓜甜瓜中期库和二倍体西瓜育种组提供,其中4份材料对南方根结线虫表现为易感,4份材料对南方根结线虫表现为感病,其余12份材料对南方根结线虫表现为低抗。根据植物抗病基因的NBS保守区设计引物,提取西瓜gDNA,采用PCR扩增西瓜抗病基因同源序列,琼脂糖电泳检测回收500 bp左右的条带,克隆测序更多还原