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辣椒雄性不育“三系”线粒体DNA的ISSR检测
【作者】 赵凯； 邓明华； 文锦芬； 邹学校； 朱海山； 张竹青；
【机构】 云南农业大学园林园艺学院； 湖南省农业科学院蔬菜研究所； 昆明理工大学现代农业工程学院；
【摘要】 <正>以湖南省蔬菜研究所选育的辣椒胞质雄性不育系9704A、保持系9704B和恢复系9701为试验材料,比较"三系"mtDNA的ISSR多态性,为揭示胞质雄性不育性与mtDNA之间的关系积累资料。利用蔗糖衬垫法提取辣椒黄化苗的线粒体DNA。PCR反应总体积为25μL,由10×PCR buffer2.5μL,Taq酶(1 U·μL-11μL,dNTP(10μmol·L-1)0.5μL,引物(8 pmol·μL-1)2μL,模板DNA(25 ng·μL-1)2μL,灭菌去离子水18.5μL组成。扩增程序:95℃预变性2 min,然后94℃变性45 s,55℃退火1 min,72℃延伸2 min,40个循环,最后72℃延伸10 min,4℃终止反应。扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳,紫外分析仪下观察照相。
【基金】 国家大宗蔬菜产业技术体系建设项目(nycytx-35-gwz4);农业部公益性行业(农业)科研专项(200903025);云南省应用基础项目(2008CD136,2009CD055)
- 【会议录名称】 中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集
- 【会议名称】中国园艺学会2011年学术年会
- 【会议时间】2011-10-19
- 【会议地点】中国安徽合肥
- 【分类号】S641.3
- 【主办单位】中国园艺学会(Chinese Society for Horticultural Science)、中国农业科学院蔬菜花卉研究所(Institute of Vegetables and Flowers,Chinese Academy of Agricultural Sciences)