中国李(Prunus salicina)5个品种S基因型的鉴定及2个新S-RNase基因的克隆(摘要)

【作者】 黄绍西； 张树军； 吴华清； 吴俊； 张绍铃；

【机构】 南京农业大学园艺学院；

【摘要】 中国李(Prunus salicina)是典型的配子体型自交不亲和性果树,生产上必须配置与主栽李品种S基因型不同的授粉品种才能获得应有的产量和品质。为了鉴定李品种的S基因型,本文以改良CTAB法提取中国李叶片、花柱和花粉的DNA和总RNA,根据李属雌蕊S识别特异决定因子S-RNase基因的保守区C2和RC4设计保守引物,以DNA为模板,选用rTaq酶进行PCR扩增,把经过纯化的产物连接到pGEM-T Easy载体,进行克隆和测序,测序工作由上海英骏生物技术有限公司完成,以3个序列中2个共有的序列为最终结果。将所获DNA序列在NCBI中进行BLASTn比对,选取序列相似性较高的3个序列,用分析软件DNAMAN进行序列分析。以中国李叶片、花柱、花粉的RNA为模板,进行RT-PCR,鉴定新基因的器官表达特异性。本研究所用引物、回收试剂盒、rTaq酶、载体、感受态细胞和试剂均来自大连宝生物公司。更多还原