胆碱通过PPARα途径减轻全肠外营养所致SD幼鼠肝损害机制的研究

【作者】 祝捷； 卢婷； 颜伟慧； 王莹； 吴江； 汤庆娅；

【机构】 上海交通大学医学院附属新华医院临床营养中心； 上海交通大学医学院营养系； 上海交通大学医学院附属新华医院上海市小儿消化与营养重点实验室；

【摘要】 目的:胆碱缺乏与肠外营养相关肝损害(PNALD)发生相关,但其机制未明。本研究旨在通过建立SD幼鼠全肠外营养(TPN)支持模型,探究胆碱减轻PNALD的具体分子机制。方法:采用SD雄性大鼠(3周),适应性喂养7天后,经颈静脉置入PICC管,术后次日随机分为3组(每组10只):①TPN组:持续输入"全合一"静脉营养液;②对照组:持续输入0.90/6生理盐水,并自由进食进水;③TPN+胆碱组:氯化胆碱(1.2 g/kg体重)溶于2 ml生理盐水,于每次更换营养液前静脉输注1.5 h。连续7天后,采血作肝功能生化检测;取肝组织HE染色后观察病理表现;检测氧化损伤(ROS及MDA含量)及抗氧化能力(SOD及GSH-Px活力);并检测肝细胞中PPARα基因启动子区甲基化水平、PPARα及其下游调控基因CPT-I mRNA及蛋白表达变化。结果:TPN组幼鼠肝脏出现弥漫的脂肪空泡变及早期胆汁淤积表现,并且血浆ALT、AST、TBil、DBil及TG含量较对照升高;而添加胆碱后,上述指标较单纯TPN组分别降低约70%,33%,40%,58%及52%(均P<0.05)。此外,TPN+胆碱组肝组织ROS及MDA水平较TPN组分别降低了40%和36%;而SOD和GSH-Px活力分别升高1.5倍及1.2倍(均P<0.05)。并且TPN中加入胆碱干预后幼鼠肝细胞PPARα基因启动子区甲基化水平较TPN组降低39%,而PPARαmRNA及蛋白表达增加2.8倍和2.6倍,其调控目标CPT-I mRNA及蛋白表达也分别上升了1.9倍和1.8倍(均P<0.05)。结论:胆碱可能通过降低TPN支持中SD幼鼠肝细胞PPARα基因启动子区甲基化水平,上调PPARα及目标基因CPT-I的表达,并提高肝细胞抗氧化能力,从而改善脂质代谢紊乱及氧化应激状态,明显减轻TPN支持引发的SD幼鼠肝功能损害。更多还原