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固相萃取-超高效液相色谱检测复杂样品中细菌产生的信号分子
【作者】 李小晶； 吕水源； 李耀平； 杨方； 蔡春平； 刘正才； 许才明；
【机构】 福建出入境检验检疫局技术中心；
【摘要】 开发了一种稳健的用固相萃取(solid-phase extraction,SPE)结合超高效液相色谱(商品名Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC;Waters,Milford,USA)定量分析复杂生物样品中七种N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs)的方法。AHLs是一种在革兰氏阴性菌中传递信息的重要生物信号分子。考察了多种商品化SPE小柱对AHLs样品的提取,净化和浓缩过程的影响,对适宜试验体系的SPE小柱进行了选择。以供细菌生长的成分复杂的培养液为实验对象,系统研究了淋洗,洗脱,溶剂更换等步骤对SPE结果的影响,优化了实验条件。用UPLC作为AHLs的分析工具,实现了多种AHLs的短时间基线分离,快速得到了各种SPE实验条件下的结果,缩短了方法的开发时间,提高了实验效率。在优化的SPE条件下利用选择的合适小柱,上载100 mL加标细菌上清液,未见SPE小柱的柱效明显降低,结果令人满意。
【关键词】 N-酰基高丝氨酸内酯；
超高效液相色谱；
固相萃取；
方法开发；
群体感应；
【基金】 福建青年人才项目资助(2007F3002)
- 【会议录名称】 微生物实用技术生态环境应用学术研讨会论文集
- 【会议名称】微生物实用技术生态环境应用学术研讨会
- 【会议时间】2008-12-27
- 【会议地点】中国广东深圳
- 【分类号】Q93-3
- 【主办单位】中国林业与环境促进会