用超速玻璃化冻存人肝组织微团构建人工肝生物反应器的初步研究

【作者】 徐兵； 吴林岚； 蒋晓织； 杨晓梅；

【机构】 福州市传染病医院肝研所；

【摘要】 目的:探索用超速玻璃化冻存人肝组织微团构建人工肝生物反应器。方法:留取肝胆疾病患者手术切除的肝组织块和做血浆置换的重型肝炎患者血浆,制备成人肝组织微团,液氮罐中冻存l周后解冻复苏,制备小组织微团,然后用鼠尾胶原溶液与其混合为人肝组织微团悬液,将其注入中空纤维反应器外腔,构建生物反应器并循环培养,之后行利多卡因转化实验和重型肝炎患者血浆灌注实验,并进行细胞漏出监测。结果:超速玻璃化冻存肝组织微团1周,解冻后的肝细胞活率为(81±3.8)%。利多卡因转化实验结果显示:利多卡因浓度在0h为80mg/L,灌注8h为56.25mg/L,灌注16h为34.92 mg/L,灌注24h为13.25mg/L。灌注16h、24h组与0h组比较差别有统计学意义(n=6,P>4.75,P<0.01)。重型肝炎患者血浆灌注实验结果显示:灌注6.5h的血氨值,灌注4.5h、6.5h的TBil值、灌注6.5h的PT值分别与灌注0.5h值比较,差别都有统计学意义(单因素方差分析F值依次=6.64,12.37,22.7,7.2,F;4.6,P<0.05)。循环灌注结束后镜检各次灌注液都未发现细胞。结论:超速玻璃化冻存人肝组织微团构建的生物反应器有明显的肝细胞代谢合成功能。更多还原