siRNA沉默GRP78增强乳腺癌细胞对顺铂敏感性的作用

【作者】 浦龙健； 黄莹莹； 李阳； 徐锦程； 蒋琛琛； 刘浩； 蒋志文；

【机构】 蚌埠医学院药学系,安徽省生化药物工程技术研究中心；

【摘要】 目的:探讨s iRNA沉默葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78,GRP78）增强顺铂（cisplat in,DDP）对乳腺癌细胞凋亡的敏感性,以期为乳腺癌的临床治疗提供新的靶点。方法:MTT法检测不同浓度(0、1、2、4、8、16μmol·L^-1)DDP对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用;PI/AnnexinV双染检测DDP(8μmol·L^-1)对siRNA转染沉默GRP78乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响,同时将未转染和转染空质粒乳腺癌细胞MDA-MB-231作为空白和阴性对照;Western blot检测DDP(8μmol·L^-1)处理乳腺癌细胞MDA-MB-231不同时间（0、6、16、24h）GRP78的表达以及siRNA转染沉默GRP78乳腺癌细胞MDA-MB-231中GRP78的表达。结果:.8μmol·L-1DDP作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231 24、48、72h细胞存活率分别为83.1 3%,54.22%,35.79%,但24h细胞凋亡率仅为10.8%。将GRP78沉默后,细胞的凋亡率为24.6%,沉默GRP78并合用DDP进行刺激,细胞的凋亡率为48.9%,明显高于单用DDP组。用DDP刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231 GRP78表达先上调后有减弱趋势,而siRNA转染沉默GRP78后,GRP78表达明显下降。结论:抑制GRP78的表达可以增加乳腺癌细胞的凋亡率,为乳腺癌的临床治疗提供新的靶点。更多还原