lncRNA H19介导小胶质细胞焦亡在老年脑梗死后认知障碍中的作用机制

【摘要】 目的 探讨长链非编码RNA H19(lncRNA H19)介导小胶质细胞焦亡在老年脑梗死后认知障碍中的作用机制。方法 纳入200例老年脑梗死患者作为试验组,另纳入100例体检健康的老年人群作为对照组,检测并比较两组血清中lncRNA H19、miR-29a及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达水平,分析各指标与认知功能的相关性。BV2小胶质细胞实验分为BV2对照组、氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)组(细胞经OGD/R处理)、lncRNA H19过表达组、lncRNA H19敲除组、lncRNA H19敲除+miR-29a抑制剂组,比较各组BV2细胞相关分子表达水平、细胞活力。选取60只健康老年SD大鼠随机分为假手术组、模型组[大脑中动脉闭塞(MCAO)模型]、Ad-NC组(MCAO+Ad-NC)、Ad-H19组(MCAO+Ad-H19)、Ad-H19+anti-miR-29a组(MCAO+Ad-H19+miR-29a抑制剂),每组12只。检测并比较各组大鼠脑组织中相关分子表达水平。结果 与对照组比较,试验组血清lncRNA H19、NLRP3的mRNA及蛋白相对表达水平显著更高, miR-29a的mRNA相对表达水平显著更低(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示：试验组患者血清lncRNA H19 mRNA相对表达水平与简易精神状态检查表(MMSE)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分均呈负相关(r=-0.752、-0.781,P=0.000、0.000<0.05)。与BV2对照组比较, OGD/R组、lncRNA H19过表达组lncRNA H19 mRNA、NLRP3蛋白相对表达水平更高, miR-29a mRNA相对表达水平更低(P<0.05)；与OGD/R组比较, lncRNA H19过表达组lncRNA H19 mRNA、NLRP3蛋白相对表达水平更高, miR-29a mRNA相对表达水平更低(P<0.05)。与lncRNA H19过表达组比较, lncRNA H19敲除组、lncRNA H19敲除+miR-29a抑制剂组lncRNA H19 mRNA、NLRP3蛋白相对表达水平更低, miR-29a mRNA相对表达水平更高(P<0.05)；与lncRNA H19敲除组比较, lncRNA H19敲除+miR-29a抑制剂组miR-29a mRNA相对表达水平显著更低,NLRP3蛋白相对表达水平显著更高(P<0.05)。与BV2对照组比较, OGD/R组lncRNA H19过表达组细胞活力更低(P<0.05)；与OGD/R组比较, lncRNA H19过表达组细胞活力更低, lncRNA H19敲除组细胞活力显著更高(P<0.05)；与lncRNA H19过表达组比较, lncRNA H19敲除组、lncRNA H19敲除+miR-29a抑制剂组细胞活力更高(P<0.05)；与lncRNA H19敲除组比较, lncRNA H19敲除+miR-29a抑制剂组细胞活力显著更低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组、Ad-NC组、Ad-H19组、Ad-H19+anti-miR-29a组lncRNA H19 mRNA、NLRP3蛋白相对表达水平显著更高, miR-29a mRNA相对表达水平显著更低(P<0.05)。与模型组比较, Ad-H19组大鼠lncRNA H19 mRNA、NLRP3蛋白相对表达水平显著更高,miR-29a mRNA相对表达水平显著更低；Ad-H19+anti-miR-29a组lncRNA H19 mRNA、NLRP3蛋白表达水平显著更低, miR-29a mRNA表达水平显著更高(P<0.05)。与Ad-H19组比较, Ad-H19+anti-miR-29a组lncRNA H19 mRNA、NLRP3蛋白表达水平显著更低, miR-29a mRNA表达水平显著更高(P<0.05)。结论 lncRNA H19通过靶向结合miR-29a,上调NLRP3炎症小体表达,激活小胶质细胞焦亡通路,进而加重老年脑梗死后认知障碍, lncRNA H19/miR-29a/NLRP3轴可作为老年脑梗死后认知障碍的潜在诊断标志物及治疗靶点。更多还原