温阳散结方含药血清调节JAK1/STAT3通路对肺癌A549细胞上皮间质转化的影响

【摘要】 目的 研究温阳散结方含药血清对肺癌A549细胞上皮间质转化的影响及对Janus激酶(JAK)1/信号转导与转录激活子(STAT)3通路的调节作用。方法 大鼠分别按照2、4、8 g/kg灌胃给予温阳散结方，1次/d,连续7 d,制备温阳散结方低、中、高剂量血清。收集A549细胞，分别设置空白对照组、模型组、温阳散结方低、中、高剂量组及阳性对照组。模型组、温阳散结方低、中、高剂量组及阳性对照组A549细胞分别加入终浓度为10 ng/ml的转化生长因子(TGF)-β1孵育48 h,建立上皮间质转化模型。温阳散结方低、中、高剂量组分别加入最终体积分数为10%的温阳散结方低、中、高剂量血清，阳性对照组加入终浓度为2μmol/L的JAK1/STAT3通路抑制剂(SHR0302),噻唑蓝(MTT)法测定A549细胞24、48、72 h增殖率，dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)测定A549细胞凋亡率，划痕实验测定A549细胞迁移率，Transwell实验测定A549细胞侵袭率，实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定A549细胞E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin、波形蛋白(Vimentin)mRNA表达，Western印迹法测定A549细胞中p-JAK1/JAK1、p-STAT3/STAT3水平。结果 与空白对照组比较，模型组A549细胞24、48、72 h增殖率，A549细胞迁移率、侵袭率、N-cadherin、Vimentin mRNA水平，p-JAK1/JAK1、p-STAT3/STAT3水平显著升高，E-cadherin mRNA表达显著降低(P<0.05);与模型组比较，温阳散结方低、中、高剂量组及阳性对照组A549细胞24、48、72 h增殖率，A549细胞迁移率、侵袭率、N-cadherin、Vimentin mRNA表达，p-JAK1/JAK1、p-STAT3/STAT3水平显著降低，A549细胞E-cadherin mRNA表达显著升高(P<0.05),且随着温阳散结方剂量增加，各项指标变化更明显(P<0.05)。结论 温阳散结方含药血清有效调节肺癌A549细胞上皮间质转化过程，进而抑制其增殖及侵袭能力并促进其凋亡，其作用过程可能通过抑制JAK1/STAT3通路而实现。更多还原