【摘要】 旨在采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对番茄中番茄红素代谢相关的关键基因进行定向编辑，从而提高番茄果实中番茄红素的含量。以石番43亲本为试验材料，基于CRISPR/Cas9系统，构建Sl LCY-E、Sl LCY-B基因的双元表达载体，用农杆菌介导的遗传转化法获得15株番茄再生苗。经PCR检测发现，有9株番茄植株呈阳性，阳性转化率为60%;对阳性植株的靶序列进行测序发现，有7株番茄发生了基因编辑，编辑效率约为77.8%，其中有4株番茄在2个靶位点均发生了基因突变。此外，Sl LCY-E、Sl LCY-B基因之间的编辑效率也存在差异，分别为55.6%、66.7%。基因编辑类型包括碱基缺失、插入。对成熟期番茄进行检测发现，在突变株果实中，番茄红素的含量均高于野生型果实，且不影响其他农艺性状，其中，12号植株果实中的番茄红素含量最高，为野生型的3.2倍。qRT-PCR结果表明，突变株中Sl LCY-E、Sl LCY-B基因的相对表达量多较野生型显著降低。综上，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制了番茄红素环化酶基因的表达，成功提高了果实中番茄红素的含量，同时证明Sl LCY-E、Sl LCY-B基因表达量与番茄红素积累量呈负相关。更多还原