通窍活血汤联合贝伐珠单抗对小鼠肺癌脑转移的疗效及其可能机制的影响

【摘要】 目的 探究通窍活血汤联合贝伐珠单抗对小鼠肺癌脑转移的疗效及其可能机制。方法 将小鼠分为空白组、模型组、通窍活血汤组、贝伐珠单抗组、联合用药组各10只。除空白组外，其他各组采用心内注射肺癌细胞PC-14建立脑转移模型。各给药组于注射前1 d开始给药，连续给药28 d。实验结束时，对脑组织进行生物发光成像和磁共振成像(MRI)扫描。取小鼠脑组织和肺组织，苏木素-伊红(HE)染色观察病理学变化；酶联免疫吸附试验检测血清中癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)、细胞角蛋白19血清片段(CYFRA)21-1水平；伊文思蓝(EB)法检测血脑屏障通透性；实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测脑肿瘤组织中CD44、血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达；Western印迹检测脑肿瘤组织中CD44、VEGF蛋白表达。结果 实验结束前，模型组全部出现神经系统症状，其中4只死亡，通窍活血汤组和贝伐珠单抗组各有1只死亡，正常组和联合用药组无死亡。实验结束时，利用生物发光系统成像，模型组全部出现可检测的脑实质转移，而通窍活血汤组、贝伐珠单抗组和联合用药组脑转移率分别为80.0%(8/10)、70.0%(7/10)和30.0%(3/10)。与模型组相比，通窍活血汤组、贝伐珠单抗组和联合用药组总颅光子通量、脑转移瘤体积及血清CEA、SCC-Ag、CYFRA21-1水平，脑组织EB质量百分数、CD44、VEGF mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05),且联合用药组上述指标进一步显著低于通窍活血汤组和贝伐珠单抗组(均P<0.05)。结论 通窍活血汤联合贝伐珠单抗降低肺癌脑转移血脑屏障通透性，通过抑制脑组织中VEGF、CD44蛋白表达抑制血管生成，进而降低肺癌脑转移的发生。更多还原