基于PINK1/Parkin信号通路探讨大补肝汤对焦虑大鼠前额叶皮质线粒体功能的影响

【摘要】 目的 探讨大补肝汤对焦虑大鼠前额叶皮质线粒体功能的影响。方法 大鼠随机分为空白组、模型组、帕罗西汀组(1.8 mg/kg)和大补肝汤高、中、低剂量组(13.2、6.6、3.3 g/kg),除空白组外，其余组大鼠均采用慢性不可预见性温和刺激法进行造模。旷场实验、高架十字迷宫实验和明暗箱实验评估大鼠焦虑程度；以JC-1为荧光探针，在多功能酶标仪和激光共聚焦显微镜下检测前额叶皮质线粒体膜电位(MMP)水平；紫外分光光度计测定前额叶皮质ATP水平；DCFH-DA荧光探针结合多功能酶标仪测定前额叶皮质ROS水平；Western blot法检测大鼠前额叶皮质PINK1、Parkin、P62、LC3B、Mfn2蛋白表达；透射电镜下观察前额叶皮质线粒体超微形态结构。结果 与模型组比较，大补肝汤高、中剂量组大鼠在旷场中总运动距离、中央区域移动距离和中央区域停留时间，十字迷宫中开放臂停留时间百分比和进入开放臂次数，明暗箱中明箱停留时间百分比和穿箱次数增加(P<0.05,P<0.01);前额叶皮质MMP和ATP水平升高(P<0.05,P<0.01),ROS水平降低(P<0.05,P<0.01);PINK1、Parkin、LC3BⅡ/Ⅰ和Mfn2蛋白表达升高(P<0.01),P62蛋白表达降低(P<0.01);线粒体肿胀及内部嵴破坏减轻，自噬体形成增多。结论 大补肝汤可能通过调节PINK1/Parkin信号通路，增强线粒体功能和自噬等作用改善大鼠焦虑状态。更多还原