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四向催化发夹组装用于活细胞中miRNA的精准检测

Four-Way Catalytic Hairpin Assembly for Precise Detection of miRNA in Living Cells

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【作者】 李甜甜何鹏李东祥

【Author】 LI Tiantian;HE Peng;LI Dongxiang;College of Chemical Engineering, Qingdao University of Science and Technology;

【通讯作者】 何鹏;

【机构】 青岛科技大学化学与分子工程学院

【摘要】 活细胞中低水平miRNA检测的扩增策略对于肿瘤生物标志物的精准检测具有重要意义。因此在本工作中设计了一种在活细胞内利用h-BNNS和四向催化发夹组装(FCHA)技术进行miRNA-21成像的扩增策略。具有低细胞毒性的h-BNNS作为优异的载体和荧光猝灭剂,将修饰有FAM的发夹DNA递送至细胞内。在细胞内miRNA-21的存在下,触发FCHA反应形成十字型DNA结构,以减弱DNA和h-BNNS之间的作用力,同时在一个DNA纳米产物上实现多个荧光信号的标记提高了检测的准确度。这种方法为活细胞内miRNA的超灵敏检测提供了强有力的工具,检测限低至0.5 pmol·L-1

【Abstract】 The amplification strategy of low level miRNA detection in living cells is of great significance for the accurate detection of tumor biomarkers. This work was designed an amplification strategy for miRNA-21 imaging using h-BNNS and four-way catalytic hairpin assembly(FCHA)in living cells. As an excellent carrier and fluorescence quencher, h-BNNS with low cytotoxicity delivers hairpin DNA modified with FAM into cells. In the presence of miRNA-21, the FCHA reaction is triggered to form a cross DNA structure for weakening the force between DNA and h-BNNS. At the same time, the labeling of multiple FAM signal on a DNA nanoproduct improves the detection accuracy. This method provides a powerful tool for the ultrasensitive detection of miRNA in living cells, and the detection limit is as low as 0. 5 pmol · L-1.

【关键词】 h-BNNSFCHAmiRNA检测可视化成像
【Key words】 h-BNNSFCHAmiRNA detectionvisual imaging
【基金】 国家自然科学基金项目(21975139)
  • 【文献出处】 青岛科技大学学报(自然科学版) ,Journal of Qingdao University of Science and Technology(Natural Science Edition) , 编辑部邮箱 ,2025年04期
  • 【分类号】O657.3;R730.43
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