牛蒡子苷元对乳腺癌细胞Bcap-37及MDA-MB-453的抑制作用及其机制

【摘要】 目的 探讨牛蒡子苷元(ARG)体外对乳腺癌细胞Bcap-37及MDA-MB-453的抑制作用及其机制。方法 体外培养Bcap-37、MDA-MB-453细胞，不同浓度ARG(终浓度为0、75、150、225、300μg/ml)处理后，噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率。ARG处理Bcap-37、MDA-MB-453细胞后，流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期；透射电镜观察自噬体形成；Western印迹检测细胞中半胱天冬酶(Caspase)-8、多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)、裂解的(Cleaved)-PARP、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化(p)-ERK、p27、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR蛋白表达。另外，将Bcap-37细胞设为Control组(不加任何药物，正常培养)、Baf A1组(5 nmol/L自噬抑制剂Bafilomycin A1)、ARG组(200μg/ml ARG)、ARG+Baf A1组(200μg/ml ARG+5 nmol/L Bafilomycin A1),采用MTT法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 与Control组比较，ARG组可抑制乳腺癌Bcap-37、MDA-MB-453细胞增殖，并呈时间和浓度依据性。与Control组比较，ARG处理后可Bcap-37、MDA-MB-453细胞凋亡率、G0/G1期比例及Cleaved-PARP、p27、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平明显升高，Caspase-8、PARP、p-ERK、CyclinD1、p-mTOR蛋白表达水平明显降低(均P<0.05),促进自噬泡形成。使用自噬抑制剂Bafilomycin A1抑制自噬后，可增强ARG对Bcap-37细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用。结论 ARG能明显抑制乳腺癌Bcap-37、MDA-MB-453细胞增殖，其机制可能与诱导细胞凋亡、引起周期阻滞及自噬有关。更多还原