高血糖对血管内皮细胞mtDNA损伤及hOGG1 mRNA表达的影响

【摘要】 目的 探究高血糖对血管内皮细胞线粒体DNA(mtDNA)损伤及人8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(hOGG1)mRNA表达的影响。方法 首先检测细胞活性确定D-葡萄糖抑制人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的最佳培养浓度，然后通过彗星实验分别评估在0、12、24、48 h时DNA损伤情况，采用流式细胞仪检测JC-1荧光染色后线粒体膜电位变化及实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞hOGG1 mRNA表达水平。结果 通过检测确定60 mmol/L的D-葡萄糖处理HUVECs抑制其增殖活性更显著(P<0.05);于0、12、24、48 h测定细胞hOGG1 mRNA相对表达值分别为0.58±0.06、0.72±0.07、0.92±0.09、1.00±0.15,提示在高糖状态下随培养时间延长，hOGG1表达水平逐渐增加，差异有统计学意义(P<0.05)。通过JC-1荧光染色后流式细胞仪检测结果于0、12、24、48 h测定细胞红/绿荧光比值分别为6.21、3.97、2.13、1.21,提示随着高血糖培养时间延长，线粒体膜电位逐渐降低。结论 高血糖状态下HUVECs内mtDNA损伤情况随时间延长逐渐加重的同时，细胞自身氧化修复过程也随之加强，但氧化损伤和自身修复存在不平衡从而导致细胞功能下降。更多还原