老年医院获得性肺炎病原体快速检测方法的建立和应用

【摘要】 目的 针对老年医院获得性肺炎(HAP)患者常见感染的6种病原微生物及耐药基因，多重聚合酶链反应(PCR)联合靶向测序(tNGS)技术，建立一种快速检测病原体方法，即pt-NGS法。方法 经生物信息学分析，设计了6种HAP常见病原微生物特异性引物，建立可进行靶向测序技术的多重PCR扩增体系。采集30例临床呼吸道分泌物或血液标本，对检测方法进行测试，并与临床样本的培养结果进行对比。结果 设计的引物具有良好特异性，样本最低检测浓度为2 copies/反应时，用实时荧光定量-PCR对该方法进行验证，检测结果的曲线与标准曲线一致，检测时间为15 h。结论 运用多重PCR和靶向测序技术，开发出针对检测老年HAP患者常见致病菌的快速、高通量方法。更多还原