【摘要】 目的 建立登革病毒(DENV)通用型实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法，检测病原微生物实验室环境中DENV的污染状况，识别实验室内易发生污染的重点部位。方法 根据DENV各血清型基因组保守序列，自行设计4个DENV血清型通用引物及探针，建立DENV通用型RT-qPCR检测方法并确定检出限和正确率，用病毒采样拭子对实验操作后的物表、常用仪器、实验室环境及个人防护用品表面进行采样，用所建立方法进行检测。结果 该研究所建立的DENV通用型RT-qPCR检测方法对不同血清型的敏感性分别为：DENV-1:38.9拷贝/反应、DENV-2:45.75拷贝/反应、DENV-3:31.75拷贝/反应、DENV-4:24.5拷贝/反应；用上海某商用试剂盒品牌以临床标本进行特异性及重复性对照，两者结果一致，特异性及重复性良好；以该法评估实验室污染风险，发现实验后实验人员个人防护装备、核酸提取实验中相关仪器设备表面污染风险较高。结论 该研究所建立DENV通用型RT-qPCR检测方法，准确度高，灵敏性较好，实验室污染风险初步评估结果，提示应重点关注核酸提取过程中的风险控制，需规范佩戴个人防护装备。更多还原