奶牛乳房炎4种常见致病菌多重PCR检测方法的建立及应用

【摘要】 为建立一种能同时检测大肠杆菌、乳房链球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌等4种病菌的多重PCR检测方法，研究针对大肠杆菌pauA基因、乳房链球菌pauA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、无乳链球菌cfb基因设计特异引物，通过对反应体系及反应条件的优化，成功建立了一种高效准确的多重PCR检测方法。特异性试验结果显示，该方法能够特异性扩增4种目的致病菌，而其他病原菌未见扩增，具有较高特异性；灵敏性试验结果显示，该方法对大肠杆菌、乳房链球菌和无乳链球菌的最低检出限度为0.1 ng/μL、对金黄色葡萄球菌最低检出限度为1 ng/μL。采用多重PCR方法和单重PCR方法分别对湖南省采集的460份临床样品进行检测，结果显示二者符合率为100%。该研究为生产实践提供了一种快速、准确的奶牛乳房炎检测技术，可用于监测奶牛乳房炎和维持奶牛乳房健康。更多还原