LncRNA ZEB2-AS1调控miR-574-3p/ZEB1轴对卵巢癌细胞迁移及侵袭的影响

【摘要】 目的 探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)锌指E盒结合同源盒蛋白2反义RNA(LncRNA ZEB2-AS)1对卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法 体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3、SW626、A2780)和正常人卵巢上皮细胞(HOSEpiC),实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p和锌指E盒结合蛋白(ZEB)1的水平。取对数生长期的SW626细胞，分为对照组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-ZEB2-AS1组、si-NC组、si-ZEB2-AS1组、si-ZEB2-AS1+inhibitor-NC组、si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组。qRT-PCR检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p表达，噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性；划痕实验检测细胞迁移能力；Transwell实验检测细胞侵袭能力；Western印迹检测细胞ZEB1和迁移、侵袭相关蛋白的表达；双荧光素酶报告基因检测验证ZEB1与miR-574-3p的靶向关系。结果 与正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC相比，人卵巢癌SKOV3、SW626、A2780细胞中ZEB2-AS1、ZEB1水平明显升高，miR-574-3p水平明显降低(P<0.05),且SW626细胞中ZEB2-AS1表达水平最高。转染后，与对照组相比，pcDNA3.1-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(VIM)、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达明显升高，E-cadherin表达明显降低(P<0.05);si-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显降低，E-cadherin表达明显增加(P<0.05)。与si-ZEB2-AS1组相比，si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显升高，E-cadherin表达明显降低(P<0.05)。双荧光素酶结果显示，高表达miR-574-3p可明显抑制ZEB1 WT的荧光素酶活性(P<0.05)。结论 在卵巢癌中，LncRNA ZEB2-AS1过表达可能通过下调miR-574-3p,上调ZEB1的表达，进而诱导上皮-间质转化(EMT),促进卵巢癌细胞的迁移与侵袭。更多还原