miR-196b靶向HOXA9对胶质瘤细胞集落形成及凋亡的影响

【摘要】 目的 探讨微小RNA-196b(miR-196b)靶向同源盒(HOX)A9对胶质瘤细胞集落形成及凋亡的影响。方法 实验分为正常组、mimic对照组、miR-196b mimic组、inhibitor对照组、miR-196b inhibitor组。除正常组外，其余各组参照Lipofectamine 2000说明书分别转染miR-196b mimic NC、miR-196b mimic、miR-196b inhibitor NC、miR-196b inhibitor。CCK-8检测细胞增殖情况；实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-196b、HOXA9 mRNA水平；集落形成实验检测细胞克隆能力；Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况；Western印迹检测细胞中HOXA9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平；双荧光素酶鉴定miR-196b与HOXA9的靶向关系。结果 与正常组、mimic对照组相比，miR-196b mimic组细胞培养12、24、36、48 h OD450,miR-196b、HOXA9 mRNA和蛋白，细胞集落形成率，Bcl-2蛋白水平均明显升高(P<0.05);细胞凋亡率，Bax蛋白水平均明显降低(P<0.05)。与正常组、inhibitor对照组相比，miR-196b inhibitor组细胞培养12、24、36、48 h OD450,miR-196b、HOXA9 mRNA和蛋白，细胞集落形成率，Bcl-2蛋白水平均明显下降(P<0.05);细胞凋亡率，Bax蛋白水平均明显升高(P<0.05)。结论 降低miR-196b可通过靶向抑制HOXA9表达，从而减少胶质瘤细胞集落形成、促进细胞凋亡，实现对胶质瘤细胞的保护。更多还原