人牙龈组织的体外培养及炎性诱导模型建立

【摘要】 目的:尝试建立一种人牙龈组织的体外培养及炎性诱导模型。方法:经志愿者知情同意后收取健康牙龈组织,牙龈组织经处理后置于被培养基水化的明胶海绵上,在37℃、5%CO₂环境中培养。分两组分别用DMEM、α-MEM培养基进行组织培养,于第2天开始加入不同浓度的肿瘤坏死因子-α（TNF-α:0、100、200ng/mL）进行炎性诱导,收取培养7天后的组织,以TNF-α（0 ng/mL）为对照组通过实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测组织中TLR4、TNF-α、P38基因的表达,通过信号因子的表达验证培养以及炎性诱导的有效性,初步筛选更适培养基以及更适TNF-α刺激浓度。结果:相较于正常培养组（TNF-α:0 ng/mL）,炎性诱导后DMEM培养基中组织的TLR4表达升高（P<0.05）、TNF-α表达升高（P<0.01）、P38表达下降（P<0.01）;α-MEM培养基中组织的TNF-α、P38表达均下降（P<0.01）。结论:本研究成功建立了一种人牙龈组织的体外培养模型,即采用MEM培养基及TNF-α浓度为100ng/mL,并初步证明了炎性诱导有效。更多还原