独活寄生汤抑制白细胞介素-1β诱导的软骨细胞凋亡的作用机制

【摘要】 目的探讨独活寄生汤抑制白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞凋亡的作用机制。方法从8只SPF级SD大鼠膝关节分离获取软骨细胞并培养,采用Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定。噻唑蓝(MTT)检测不同浓度独活寄生汤对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响,从而优化独活寄生汤最佳干预浓度。将第2代软骨细胞随机分为空白组、模型组、独活寄生汤组,空白组以含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养液培养,模型组以10 ng/ml IL-1β和10%FBS的DMEM培养液培养,独活寄生汤组采用300μg/ml独活寄生汤、10 ng/ml IL-1β和10%FBS的DMEM培养液培养。干预48 h,逆转录PCR检测各组软骨细胞中miR-98的表达;Western印迹法检测各组软骨细胞中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达。结果Ⅱ型胶原免疫组化染色后阳性组软骨细胞胞质为棕黄色。100、200、300、400μg/ml独活寄生汤均能抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,以300μg/ml独活寄生汤最为明显(P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组软骨细胞中miR-98表达明显下降(P<0.05)。与模型组比较,独活寄生汤组软骨细胞中的Bcl-2蛋白表达显著升高,而Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论独活寄生汤能够抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,可能是通过下调miR-98起作用的。更多还原