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广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶AcCBL1和AcCBL2基因的克隆、表达及鉴定  
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【英文篇名】 Cloning, expression and identification of cysteine protease genes AcCBL1 and AcCBL2 of Angiostrongylus cantonensis
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【作者】 白慧芳; 柯琪文; 陈韵秋; 刘芷晴; 张玲敏; 吴春云; 袁桂秀; 詹希美; 程梅;
【英文作者】 BAI Hui-fang; KE Qi-wen; CHEN Yun-qiu; LIU Zhi-qing; ZHANG Ling-min; WU Chun-yun; YUAN Gui-xiu; ZHAN Xi-mei; CHENG Mei; Department of Pathogen Biology; Medical College; Jinan University; Department of Clinical Medicine; Department of Parasitology; Zhongshan School of Medicine; Sun Yat-sen University;
【作者单位】 暨南大学基础医学院病原生物学教研室; 暨南大学基础医学院临床医学系; 中山大学中山医学院寄生虫学教研室;
【文献出处】 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 , Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 编辑部邮箱 2018年 05期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 广州管圆线虫; 半胱氨酸蛋白酶; 表达; 鉴定;
【英文关键词】 Angiostrongylus cantonensis; Cysteine protease; Expression; Identification;
【摘要】 目的克隆、表达广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶1 (AcCBL1)和AcCBL2基因,分析重组半胱氨酸蛋白酶rAcCBL1和rAcCBL2的免疫反应性。方法基于广州管圆线虫Ⅳ期幼虫的cDNA文库筛选获得AcCBL1和AcCBL2基因,构建pET-28a-AcCBL1和pET-28a-AcCBL2重组质粒,转入大肠埃希菌BL21 (DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达、镍柱纯化后,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)分析重组蛋白表达情况。蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白对6×His标签单克隆抗体、感染广州管圆线虫的小鼠和患者血清的免疫反应性。结果AcCBL1和AcCBL2基因PCR扩增产物分别约为1 000、1 100 bp。SDS-PAGE结果显示, rAcCBL1为可溶表达蛋白,相对分子质量(M_r)约为37 800; rAcCBL2主要以包涵体形式存在,约为M_r 40 800。Western blotting结果显示, rAcCBL1和rAcCBL2能与6×His标签单克隆抗体、感染广州管圆线虫的小鼠和患者血清特异性结合。结论成功克隆和表...
【英文摘要】 Objective To clone and express the cysteine protease genes AcCBL1 and AcCBL2 of Angiostrongylus cantonensis,and analyze the immunoreactivity of the purified recombinant proteins.Methods Two cysteine protease genes AcCBL1 and AcCBL2 were identified from Angiostrongylus cantonensis fourth-stage larvae cDNA library,and cloned into pET-28a vector to generate recombinant plasmids pET-28a-AcCBL1 and pET-28aAcCBL2,respectively.The constructed recombinant plasmids were transformed into(E.coli)BL21(DE3)respectively ...
【基金】 国家自然科学基金(No.81401680); 广东省医学科学技术研究基金(No.A2015334); 中央高校基本科研业务费专项资金(No.21613306)~~
【更新日期】 2018-11-20
【分类号】 R383.19
【正文快照】 广州管圆线虫病是由广州管圆线虫(Angiostr-ongylus cantonensis)感染引起的一种人兽共患寄生虫病,主要表现为嗜酸粒细胞增多性脑膜炎。近年来,随着人们生活习惯的改变,该病的发生呈现逐年增长的趋势。截至目前,该病的发病机制仍不清楚,且缺乏有效的诊断、治疗及预防措施。因此

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