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鸭肠炎病毒UL24/C基因酵母双杂交诱饵载体构建及鉴定  
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【英文篇名】 Construction and identification bait vector of duck enteritis virus UL24/C gene in yeast two-hybrid system
【下载频次】 ★★☆
【作者】 高兴红; 贾仁勇;
【英文作者】 GAO Xing-hong; JIA Ren-yong; Key Laboratory of Infectious Diseases and Biosecurity; Provincial Department of Education; Zunyi Medical College; Avian Disease Research Center; College of Veterinary Medicine; Sichuan Agricultural University; Institute of Preventive Veterinary Medicine; Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province;
【作者单位】 遵义医学院贵州省普通高等学校传染病与生物安全特色重点实验室; 四川农业大学禽病防治研究中心; 四川农业大学预防兽医研究所; 动物疫病与人类健康四川省重点实验室;
【文献出处】 中国预防兽医学报 , Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 编辑部邮箱 2018年 06期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 鸭肠炎病毒; UL24基因; 酵母双杂交; 诱饵载体;
【英文关键词】 duck enteritis virus; UL24 gene; yeast two-hybrid; bait vector;
【摘要】 为构建DEV UL24/C蛋白的酵母双杂交的诱饵载体,本研究以DEV CHv株基因组DNA为模板,经一步法克隆构建pGBKT7-UL24/C诱饵质粒,质粒转化酵母菌株后进行自激活活性检测、免疫印迹检测和毒性检测。结果显示,诱饵质粒pGBKT7-UL24/C插入片段大小为510 bp,且未发生基因突变;pGBKT7-UL24/C质粒转化Y2HGold菌株后的自激活检测显示诱饵菌株无自激活活性,免疫印迹检测表明该诱饵菌株成功表达DEV UL24/C蛋白,毒性检测表明该诱饵蛋白对宿主菌Y2HGold无毒性作用。综上表明,未研究正确构建了UL24/C基因酵母双杂交诱饵载体Y2HGold(pGBKT7-UL24/C),为筛选与DEV UL24蛋白相互作用蛋白、探究DEV UL24蛋白功能及分子机制奠定了基础。
【英文摘要】 To generate a bait strain Y2 HGold(pGBKT7-UL24/C) using yeast two-hybrid, the bait plasmid of pGBKT7-UL24/C was constructed by one-step cloning with UL24/C gene fragment amplified from genomic DNA of duck enteritis virus(DEV) CHv strain as a template. And after the plasmid being transformed into yeast strain, the bait protein was detected by selfactivating activity, western blot and toxicity assays. The results indicated that the insert fragment in bait plasmid of pGBKT7-UL24/C was 510 bp. Self-activation a...
【基金】 国家重点研发计划(2017YFD0500800); 四川省科技厅项目(2017JY0014/2017HH0026); 遵义市与遵义医学院市校联合基金(遵市科合社字2017/22号); 遵义医学院博士启动基金(F-811)
【更新日期】 2018-08-22
【分类号】 S852.65
【正文快照】 鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)属于疱疹病毒目疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科马立克病毒属,是一种泛嗜性全身性感染的线性ds DNA病毒[1]。临床表现为急性败血过程,以炎症和坏死、血管损伤、消化道出血、淋巴器官受损以及实质器官退行性变化为主要特征,发病率和死亡率均高,?

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