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黄色荧光蛋白的结构对Annexin A5凋亡检测功能的影响探究  
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【英文篇名】 The Influence of Structrue of Yellow Fluorescent Proteins on the Apoptotic Detection Ability of Annexin A5
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【作者】 高梦月; 王云轲; 黄先杰; 张晶; 华子春;
【英文作者】 Gao Mengyue; Wang Yunke; Huang Xianjie; Zhang Jing; Hua Zichun; School of Life Sciences; the State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology; Nanjing University; Reserach Institute of Pharmaceutical Biotechnology; Jiangsu Industrial Technology Research Institute and High-Tech Research Institute of Nanjing University at Changzhou; Shenzhen Research Institute of Nanjing University;
【作者单位】 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室; 江苏省产业技术研究院医药生物技术研究所常州南京大学高新技术研究院; 南京大学深圳研究院;
【文献出处】 中国细胞生物学学报 , Chinese Journal of Cell Biology, 编辑部邮箱 2018年 11期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 膜联蛋白A5; 纯化; 凋亡检测; 流式细胞术; 序列比对;
【英文关键词】 Annexin A5; purification; apoptosis detection; FCM(flow cytometry); sequence alignment;
【摘要】 细胞凋亡早期,磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内侧翻转到细胞膜外侧, Annexin A5可与PS高亲和力结合,这是其检测凋亡的原理。绿色荧光探针标记的Annexin A5和碘化丙啶联合标记应用于流式细胞术进行细胞凋亡检测,该方法灵敏度高、特异性好、效率高,已成为目前全世界通用的细胞凋亡检测方法。除FITC-Annexin A5外, Annexin A5-EGFP融合蛋白是另一个常用的简单、可信、易于制备的凋亡检测探针。黄色荧光蛋白是绿色荧光蛋白的一种突变体,其荧光向红色光谱偏移。目前,有三种改良的黄色荧光蛋白:Citrine、Venus、Ypet,这三种改良的蛋白荧光更亮、更稳定、成熟更快。该文选择Citrine、Venus、Ypet来制备Annexin A5凋亡检测探针,通过原核表达和分离纯化Annexin A5-Citrine、Annexin A5-Venus和Annexin A5-Ypet融合蛋白,获得了高产量的可溶性蛋白,探究这三种融合蛋白与凋亡细胞的结合能力,筛选出适用于流式检测的黄色荧光蛋白标记的Annexin A5,为后续研究奠定基础。以pET28a-Annexin A5-EGFP-his重组质粒...
【英文摘要】 At the early stage of apoptosis, phosphatidylserine(PS) will turn over from the inner cell membrane to the outer cell membrane. When calcium ions are present, Annexin A5 can combine to PS at high affinity and this is the principle of apoptosis detection. Apoptosis detection based on Annexin A5 labeled with green fluorescent probes/iodide by FCM(flow cytometry) is sensitive, efficient and specific. Annexin A5-EGFP fusion protein is a simple, reliable apoptosis detection probe and it is easy to prepare. Yello...
【基金】 国家重点研发计划(批准号:2017YFA0104301、2016YFC0902700、2017YFA0506002); 国家自然科学基金(批准号:81630092、81773099、81570790、81573338); 深圳市科技创新委员会(批准号:JCYJ20160331152141936、KQTD20140630165057031)资助的课题~~
【更新日期】 2018-12-07
【分类号】 Q255
【正文快照】 The Influence of Structrue of Yellow Fluorescent Proteins on theApoptotic Detection Ability of Annexin A5Gao Mengyue1, Wang Yunke1, Huang Xianjie1, Zhang Jing1*, Hua Zichun1,2,3*(1School of Life Sciences, the State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotech

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