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禽多杀性巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌和大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及应用  
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【英文篇名】 Establishment and Application of Multiplex PCR Assay for Detecting Pasteurella multocida,Haemophilus paragallinarumand Escherichia coli
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【作者】 张曼; 韩飞; 沈文正; 何亚鹏;
【英文作者】 ZHANG Man; HAN Fei; SHEN Wenzheng; HE Yapeng; Yangling Vocational & Technical College;
【作者单位】 杨凌职业技术学院;
【文献出处】 西北农业学报 , Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 编辑部邮箱 2018年 02期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 多重PCR; 多杀性巴氏杆菌; 副鸡嗜血杆菌; 大肠杆菌; 检测;
【英文关键词】 Multiplex PCR; Pasteurella multocida; Haemophilus paragallinarum; Escherichia coli; Detection;
【摘要】 为了建立鉴别禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)、副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum)和大肠杆菌(Escherichia coli)的多重PCR检测方法,参照GenBank中登录的3种细菌基因组序列,合成3对特异性引物,通过优化多重PCR反应条件,建立快速检测3种细菌的多重PCR方法。特异性试验结果表明,可分别扩增出3种细菌对应的目的片段,对Ⅰ群禽腺病毒4型(FAV-4)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(Salmonellaspp)、鸡胚成纤维细胞(DF-1)的DNA和灭菌双蒸水均无扩增;敏感性试验结果表明,最低检测量分别为24.3pg/μL禽多杀性巴氏杆菌、21.4pg/μL副鸡嗜血杆菌和28.6pg/μL鸡大肠杆菌的基因组DNA;应用该方法对83份临床病料进行检测,结果与其他已建立的单重PCR检测一致,说明所建立的方法可用于临床上3种细菌的鉴别诊断。
【英文摘要】 A multiplex polymerase chain reaction assay was developed for the detection of Pasteurella multocida,Haemophilus paragallinarum,and Escherichia coli.According to the genome sequence of P.multocida,H.paragallinarum,and Escherichia coli in GenBank,three pairs of primers were synthetized.The multiplex PCR reaction condition was optimized and the multiplex PCR for simultaneously detecting P.multocida,H.paragallinarum,and Escherichia coli was established.The specificity test showed that target fragments were obt...
【基金】 陕西省咸阳市重大科技创新项目(2016K01-43); 杨凌农业高新技术示范区重大科技项目(2016-XY-16)~~
【更新日期】 2018-03-05
【分类号】 S852.61
【正文快照】 禽巴氏杆菌病由多杀性巴氏杆菌(Pasteu-rella multocida)引起,该病已成为养鸡业中最常见的传染病之一,主要引起成年鸡出现急性败血症状,发病率高,死亡率高,有时为慢性经过,表现为慢性呼吸道症状,生产性能下降。该病在世界各国广泛流行[1-2],危害较大,目前对该病的诊断仍普遍采?

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