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GFP/DsRED-TaATG8h融合基因的表达载体构建及在小麦原生质体中的表达  
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【英文篇名】 Construction of Expression Vectors for GFP/DsRED-TaATG8h Fusion Genes and Their Expression in Wheat Protoplasts
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【作者】 李开心; 刘彦妮; 于宝佳; 岳洁瑜; 王华忠;
【英文作者】 LI Kaixin; LIU Yanni; YU Baojia; YUE Jieyu; WANG Huazhong; Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance; School of Life Sciences; Tianjin Normal University;
【作者单位】 天津师范大学生命科学学院天津市动植物抗性重点实验室;
【文献出处】 天津农业科学 , Tianjin Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2018年 03期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 小麦; 细胞自噬; ATG8; 原生质体;
【英文关键词】 wheat; autophagy; ATG8; protoplast;
【摘要】 细胞内自噬水平监测方法的建立是深入揭示自噬调控机制和生理功能的重要基础。ATG8蛋白定位于自噬小体膜上,对其荧光蛋白标记分子的荧光观察是监测细胞内自噬发生水平的重要方法。本研究选择小麦ATG8家族的TaATG8h基因,构建了GFP-TaATG8h和DsRED-TaATG8h融合基因表达载体,载体构建的正确性得到酶切和测序结果的确认;以易于转化的小麦原生质体为受体,实现了两个融合基因在原生质体细胞中的高效表达,在表达融合蛋白的细胞中观察到了清晰的荧光。本研究结果为在重要农作物小麦上建立以ATG8为靶标的自噬水平监测技术和深入探索自噬在小麦生长发育中的作用奠定了基础。
【英文摘要】 The establishment of autophagy monitoring method was important for revealing the regulation mechanisms and physiological functions of autophagy. ATG8 locates on autophagosome membranes and its fluorescent protein-tagged forms have been successfully used to monitor autophagy level in cells. In this study, TaATG8h, one member of the wheat ATG8 family, was selected and GFP-TaATG8h and DsRED-TaATG8h fusion gene expression vectors were constructed. The correctness of constructed vectors was confirmed by results ...
【基金】 天津市自然科学基金(17JCZDJC33800); 天津师范大学中青年教师学术创新推进计划(135202XC1604); 天津市高校“中青年骨干创新人才培养计划”(135205GC53)
【更新日期】 2018-03-23
【分类号】 S512.1
【正文快照】 细胞自噬(autophagy)是真核生物细胞内一种保守的物质分解和循环利用机制。在自噬过程中,细胞质内待降解底物被包裹进双层膜结构的自噬小体,随着自噬小体外膜与液泡(动物是溶酶体)膜的融合,内膜及包裹的底物(此时称为自噬小泡)进入液泡腔被分解[1-3]。多种自噬相关因子(autopha

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