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抗鳞翅目害虫基因cry1C的抗原表位分析及多克隆抗体制备  
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【英文篇名】 Antigenic Epitope Analysis and Preparation of Polyclonal Antibody of Lepidopteran Pest-resistant Gene cry1C
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【作者】 金永梅; 陈莫军; 刘笑笑; 林秀峰;
【英文作者】 JIN Yong-mei; CHEN Mo-jun; LIU Xiao-xiao; LIN Xiu-feng; Jilin Academy of Agricultural Sciences;
【作者单位】 吉林省农业科学院;
【文献出处】 生物技术通报 , Biotechnology Bulletin, 编辑部邮箱 2018年 09期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 鳞翅目害虫; cry1C; 抗原表位; 序列优化; 多克隆抗体;
【英文关键词】 Lepidopteran pest; cry1C; antigenic epitope; codon optimization; polyclonal antibody;
【摘要】 利用生物信息学方法预测cry1C蛋白的抗原表位区,并命名为Δcry1C。优化Δcry1C的核苷酸序列并进行人工合成,构建重组表达载体pET28b(+)-Δcry1C。在E.coli中诱导表达His6-Δcry1C蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,分离、纯化获得cry1C多抗血清。ELISA测定结果表明,抗体效价最高可达1∶512 000。Western Blot分析结果表明,cry1C多克隆抗体能够与cry1C转基因抗虫水稻蛋白特异性结合。利用生物信息学筛选抗原表位区并优化序列、原核表达重组蛋白、免疫制备cry1C多克隆抗体,为深入研究抗鳞翅目害虫植物提供了前提条件。
【英文摘要】 In this study,cry1 C antigenic epitope region of cry1 C was predicted by bioinformatics analysis and designated as Δcry1 C.The nucleotide sequence of the Δcry1 C was synthesized after codon optimization,and then recombinant expression vector pET28 b(+)-Δcry1 Cwas constructed. To prepare cry1 C polyclonal antibody,His6-Δcry1 C recombinant protein was purified after induction in Escherichia coli competent cell BL21(DE3),and then was used to immunize New Zealand white rabbits as antigen. ELISA assay showed tha...
【基金】 国家转基因重大项目(2016ZX08001001-001-007); 吉林省科技发展计划重点科技攻关项目(20160204033NY); 吉林省农业科技创新工程项目(CXGC2017TD009)
【更新日期】 2018-11-02
【分类号】 S433.4
【正文快照】 水稻是我国的重要粮食作物之一。水稻害虫是水稻丰产和稳产的重要限制因子,每年给我国水稻生产造成的损失可占总产量的5%-10%,且有逐年加重之趋势,其中鳞翅目害虫是水稻生产危害最大的害虫。至今,水稻中还未发现抗这类害虫的种质资源,因此通过常规育种方法很难培育出抗鳞翅目害

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