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莱茵衣藻玻璃珠法转化线性质粒  
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【英文篇名】 Linear plasmids transformation of Chlamydomonas reinhardtii by glass-bead method
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【作者】 黄亚萍; 王川; 冯秀芳; 张宇;
【英文作者】 Yaping Huang; Chuan Wang; Xiufang Feng; Yu Zhang; College of Bioengineering; Sichuan University of Science & Engineering;
【作者单位】 四川理工学院生物工程学院;
【文献出处】 生物技术 , Biotechnology, 编辑部邮箱 2018年 05期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 莱茵衣藻; 玻璃珠法; 单酶切; 线性质粒; 转化;
【英文关键词】 Chlamydomonas reinhardtii; glass-bead method; single enzyme digestion; linear plasmids; transformation;
【摘要】 [目的]研究线性质粒的转化,提高衣藻外源基因的转化效率。[方法]进行p SP108质粒单酶切试验,采用玻璃珠法转化线性质粒并对转化的关键条件进行优化,最后经抗性筛选、PCR及RT-PCR验证转化情况。[结果]经Bam HⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ、SacⅠ单酶切制备的p SP108线性质粒均能成功转化,Bam HⅠ酶切后转化率最高,质粒最佳用量为4μg,最佳震荡时间为25 s,博来霉素最适筛选浓度为15μg/m L。[结论]为构建衣藻生物反应器提供实验基础。
【英文摘要】 [Objective]Researching linear plasmids transformation system and improving the transformation efficiency of C. reinhardtii. [Methods]The single enzyme cutting test of p SP108 plasmid was carried out,the linear plasmid was transformed by glass-bead method and key transformation conditions were optimized,finally,the transformation result was verified by resistance screening,PCR and RT-PCR detection.[Results] The linear plasmid single enzymed by Bam HⅠ,XbaⅠ,EcoRⅠ and SacⅠcould be successfully transformed,and t...
【基金】 四川省科技厅应用基础项目(“高活力表达人表皮生长因子(EGF)的衣藻生物反应器的研究”,No.2014JY0203); 四川理工学院研究生创新基金项目(“莱茵衣藻细胞核稳定转化外源基因条件的优化”,No.y2017046); 自贡市科技局创新苗子工程项目(“莱茵衣藻细胞核转化体系的优化及CRP表达的研究”,No.2018CXMZ03)
【更新日期】 2018-11-21
【分类号】 Q78
【正文快照】 莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)是一种单细胞真核绿藻,属于绿藻门、鞭毛纲、团藻目、绿藻科、衣藻属[1],衣藻与酵母类似,具有培养条件简单、生长速度快、光合效率高等特点,因此素有“光合酵母”之称[2]。莱茵衣藻的细胞核、叶绿体、线粒体三套基因组都能进行遗传转化,细?

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