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基于包膜蛋白和Tat蛋白筛选HIV-1细胞融合抑制剂的高效方法  
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【英文篇名】 Tat-based cell-cell fusion method for screening HIV-1 fusion inhibitors
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 王小利; 杨怡姝; 沈思嗣; 王先良; 冯甜; 胡秦; 曾毅;
【英文作者】 Xiaoli Wang; Yishu Yang; Sisi Shen; Xianliang Wang; Tian Feng; Qin Hu; Yi Zeng; College of Life Science and Bioengineering; Beijing University of Technology; National Institute of Environmental Health Chinese Center for Disease Control and Prevention;
【作者单位】 北京工业大学生命科学与生物工程学院; 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全研究所;
【文献出处】 生物工程学报 , Chinese Journal of Biotechnology, 编辑部邮箱 2018年 03期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 HIV-1; 细胞-细胞融合; 进入抑制剂; 药物筛选;
【英文关键词】 HIV-1; cell-cell fusion; entry inhibition; drug screening;
【摘要】 旨在建立一个细胞-细胞融合系统,高效筛选对HIV-1病毒细胞-细胞间传播有抑制作用的药物。构建了p EGFP-Tat质粒,将p EGFP-Tat质粒和HIV-1包膜质粒共转染HEK-293T细胞,成为表达Tat蛋白和包膜蛋白的效应细胞,然后与表达CD4及辅助受体和β-半乳糖苷酶、荧光素酶双报告基因的靶细胞TZM-bl融合,建立了细胞-细胞融合系统,并进行条件优化,确定了最佳的融合体系。用阳性融合抑制剂maraviroc以及没有融合抑制作用的AZT和raltegravir作用于该体系,证明该系统可以特异性有效筛选具有细胞融合抑制作用的药物。用该系统测试了8个样本,发现两种样品对融合有一定的抑制作用。该方法背景值低,特异性强,可用来高效筛选具有切断HIV-1病毒细胞-细胞间传播作用的抗病毒药物。
【英文摘要】 An HIV-1 cell-cell fusion system was developed to screen HIV-1 entry inhibitors that block cell-cell fusion. In this system, the p EGFP-Tat plasmid was constructed and cotransfected into effector cells(HEK-293 T) with HIV-1 envelope plasmid. TZM-bl cell, a genetically engineered cell line that expresses CD4, CXCR4, CCR5 as well as Tat-inducible β-galactosidase and luciferase reporter gene, was used as target cell. Thus, the co-culture of target cells and effector cells allows the cell fusion via Env and the...
【基金】 国家自然科学基金(No.81202976); 北京市教委项目(No.KM201510005029); 国家科技重大专项项目(No.2014ZX10005002-007)资助~~
【更新日期】 2018-04-10
【分类号】 R91
【正文快照】 Received:July 5,2017;Accepted:August 25,2017Supported by:National Natural Science Foundation of China(No.81202976),Scientific Research Project of Beijing EducationalCommittee(No.KM201510005029),National Science and Technology Major Project of the Ministry

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