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整合素α4半胱氨酸突变质粒的构建及谷胱甘肽化水平检测  
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【英文篇名】 Establishment of Cys-mutant integrin α4 plasmids and examination of glutathionylation
【下载频次】 ★★☆
【作者】 尤媛媛; 陈善泽; 李东珏; 郭婧; 黄宁; 李婧瑜;
【英文作者】 You Yuan-yuan; Chen Shan-ze; Li Dong-jue; Guo Jing; Huang Ning; Li Jing-yu; Department of Pathophysiology; West China School of Basic Medical Sciences and Forensic Medicine; Sichuan University;
【作者单位】 四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室;
【文献出处】 四川生理科学杂志 , Sichuan Journal of Physiological Sciences, 编辑部邮箱 2018年 04期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 整合素α4; 半胱氨酸; 谷胱甘肽化;
【英文关键词】 Integrin α4; Cysteine; Glutathionylation;
【摘要】 目的:旨在构建整合素α4半胱氨酸突变质粒,并初步鉴定α4的谷胱甘肽化修饰位点。方法:利用点突变技术将整合素α4的半胱氨酸残基分别突变为天冬氨酸残基,以免疫共沉淀的方法利用anti-Flag琼脂糖珠富积突变的α4蛋白,采用体外谷胱甘肽化的方法检测突变α4的谷胱甘肽化水平。结果:构建了α4的81、85、278、717、767、828位的半胱氨酸单突变质粒,体外谷胱甘肽化检测表明这些单突变的α4仍具有谷胱甘肽化修饰。结论:成功构建了整合素α4所有的未形成二硫键的半胱氨酸突变的真核表达质粒,初步判定α4可能具有多个位点半胱氨酸残基同时被谷胱甘肽化修饰。
【英文摘要】 Objective:To construct a series of cysteine mutant forms of Flag-α4,and to identify sites ofα4glutathionylation.Methods:Cys-to-Asp Flag-α4mutant plasmids were generated by site directed mutagenesis.Then Flag-α4mutant proteins were accumulated through anti-Flag Pulldown assay.Levels of glutathionylation ofα4were measured by glutathionylation assay.Results:We generated six plasmids as follows Flag-α4 81 Asp,Flag-α4 85 Asp,Flag-α4 278 Asp,Flag-α4 717 Asp,Flag-α4 767 Asp,Flag-α4 828 Asp.We found that all of the...
【基金】 国家自然科学青年科学基金项目(编号:31401188); 四川大学优秀青年学者科研基金(编号:2016SCU04A08)
【更新日期】 2019-01-25
【分类号】 R363
【正文快照】 谷胱甘肽化是一种重要的氧化还原性翻译后修饰,可导致蛋白可逆的功能性改变[1-3]。在一些细胞中,活性氧的产生推动着蛋白的半胱氨酸残基上的自由巯基(-SH)与谷胱甘肽(Glutathione,GSH)相互作用形成蛋白-谷胱甘肽混合二硫加和物(Pr-SSG)[4]。S-谷胱甘肽化化影响多种蛋白的功能,?

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