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【英文篇名】 |
The gene transfection and establishment of hepatic stellate cells with high expression of transforming growth factor beta 1 in rats |
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【下载频次】 |
☆ |
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【作者】 |
周霞;
黄效模;
张一;
曾德珍; |
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【英文作者】 |
Zhou Xia; |
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【作者单位】 |
贵州省人民医院; |
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【文献出处】 |
浙江临床医学
, Zhejiang Clinical Medical Journal, 编辑部邮箱
2018年 07期
期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
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【中文关键词】 |
转化生长因子β_1;
分子克隆;
肝星状细胞; |
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【英文关键词】 |
Transforming growth factor beta 1;
Molecular cloning;
Hepatic stellate cells; |
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【摘要】 |
目的 克隆大鼠转化生长因子β_1(TGFβ_1)基因并转染肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSC),筛选稳定高表达TGFβ_1的阳性克隆。方法采用逆转录-聚合酶链式应(RT-PCR)从大鼠成骨细胞中扩增出特异性片段,经酶切鉴定证实为大鼠TGFβ_1cDNA,将此片段插入pcDNA3.1(+)表达载体,构建得到pcDNA3.1(+)-TGFβ_1重组质粒。应用阳离子脂质体介导的基因转移技术将TGFβ_1表达载体导入大鼠HSC,经G418筛选高表达TGFβ_1的阳性克隆,用荧光定量PCR法及Western blot法检测TGFβ_1mRNA及蛋白的表达。结果重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-TGFβ_1经限制性内切酶BamHI酶切,电泳后显示的TGFβ_1目的 片段和5.4kb的pcDNA3.1(+)载体片段,测序证实酶切片段与GenBank中登记的TGFβ_1全长序列相同,证实pcDNA3.1(+)-TGFβ_1真核表达载体构建成功,转染HSC并经G418筛选出阳性克隆后,TGFβ_1mRNA及蛋白的表达明显增高(P<0.05)。结论重组TGFβ_1真核表达载体构建正确,并可成功... |
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【英文摘要】 |
Objective To clone the gene of transforming growth factor-β_1( TGF-β_1) and transfect it into hepatic stellate cells(HSC) to screen positive clones that stably express TGF-β_1.Methods The specific fragment was amplified from rat osteoblasts by reverse transcription polymerase chain reaction( RT-PCR), confirmed by enzyme digestion of rat TFG-β_1 cDNA, and inserted into the pcDNA3.1( +) expression vector,the pcDNA3.1( +)-TGFβ_1 recombinant plasmid was constructed. The TFG β_1 expression vector was introduced ... |
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【更新日期】 |
2024-04-16 10:15 |
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【分类号】 |
R575.2 |
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【正文快照】 |
肝纤维化的形成机制是一个有众多因素参与复杂的病理过程,肝纤维化实质是慢性肝病损伤修复反应,肝星状细胞(HSC)在肝纤维化过程中起核心作用,各种原因肝损伤时,弓丨起肝脏细胞外基质(ECM)合成增加,降解减少,进而造成肝内ECM不断积聚,最后导致肝纤维化甚至肝硬化。TGF(3,是HSC活 |
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