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利用不依赖连接反应的克隆方法构建pCHF3-MAP65-1-YFP和pCHF3-MAP65-2-YFP表达载体  
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【英文篇名】 Construction of the pCHF3-MAP65-1-YFP and the pCHF3-MAP65-2-YFP vectors with ligation-independent cloning method
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【作者】 王培培; 韩榕;
【英文作者】 WANG Pei-pei; HAN Rong; College of Life Science; Shanxi Normal University; Higher Education Key Laboratory of Plant Molecular and Environmental Stress Response;
【作者单位】 山西师范大学生命科学学院; 植物分子与环境胁迫响应山西省高等学校重点实验室;
【文献出处】 江苏农业学报 , Jiangsu Journal of Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2018年 02期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 LIC方法; 拟南芥; MAP65-1; MAP65-2;
【英文关键词】 ligation-independent cloning(LIC) method; Arabidopsis thaliana; MAP65-1; MAP65-2;
【摘要】 利用不依赖于连接反应的克隆(Ligation-independent cloning,LIC)方法构建了p CHF3-MAP65-1-YFP和p CHF3-MAP65-2-YFP载体,用于研究拟南芥微管结合蛋白MAP65-1和MAP65-2在细胞中的定位及UV-B辐射下有丝分裂异常现象的产生机制。试验结果表明,相对于传统载体构建方法,LIC方法试验设计操作简便,耗时短,转化率高,可减少后期重组子筛选工作。
【英文摘要】 The method of ligation-independent cloning(LIC) was used to construct pCHF3-MAP65-1-YFP and pCHF3-MAP65-2-YFP vector that would be used for subsequent research of localization of the Arabidopsis thaliana microtubule binding protein MAP65-1 and MAP65-2 in the cell and the production mechanism of mitotic anomaly in UV-B radiation. The results showed that the method of LIC had simple operation,short time consuming,high conversion rate,and less workload of later screening recombinant,compared with the tradition...
【基金】 国家自然科学基金项目(30671061); 山西省自然科学基金项目(2008011059-1)
【更新日期】 2018-05-15
【分类号】 Q943.2
【正文快照】 041000)克隆是目前最常用的一种研究基因功能的方法。传统PCR产物克隆方法主要有2种:黏性末端连接[1]和平末端连接[2]。平末端连接方式操作相对简单,无需经过多次酶切,但是克隆成功率较低。传统的克隆方法看似简单,但试验设计和操作过程比较繁琐,在设计引物时目的片段酶切位点?

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