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中国兰ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选  
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【英文篇名】 Optimization and primer screening of ISSR-PCR reaction system for Chinese Orchids
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【作者】 黄晓慧; 巫伟峰; 陈春; 张毅智; 汪长水; 徐建球; 陈发兴; 陈孝丑;
【英文作者】 HUANG Xiao-hui; WU Wei-feng; CHEN Chun; ZHANG Yi-zhi; WANG Chang-shui; XU Jian-qiu; CHEN Fa-xing; CHEN Xiao-chou; Fujian Forestry Science and Technology Test Center; Institute of Subtropical Fruit; Fujian Agriculture and Forestry University;
【作者单位】 福建省林业科技试验中心; 福建农林大学园艺学院;
【文献出处】 南方农业学报 , Journal of Southern Agriculture, 编辑部邮箱 2018年 07期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 中国兰; ISSR; 分子标记; 反应; 引物筛选;
【英文关键词】 Chinese orchid; ISSR; molecular marker; reaction; primer screening;
【摘要】 【目的】优化中国兰的ISSR-PCR反应体系,并筛选适用于中国兰ISSR分析的候选引物,为ISSR分子标记在中国兰的辅助育种及亲缘关系和遗传多样性分析等提供技术参考。【方法】以6个中国兰品种为材料,采集其叶片样品,分别用研钵法和研磨仪法进行破碎研磨,比较两种方法提取DNA的效果,利用L25(53)正交试验和单因素试验对DNA模板量、引物浓度、2×Taq Master Mix添加量、循环数和退火温度进行优化,建立最佳ISSR-PCR反应体系,并从ISSR分子标记通用引物中筛选适用于中国兰的ISSR分析候选引物。【结果】研磨仪法提取的DNA浓度明显高于研钵研磨法,但二者提取的DNA质量均较好(OD_(260)/OD_(280)为1.7~2.0)。对ISSR-PCR反应体系扩增结果的影响程度排序为DNA模板量>引物浓度>2×Taq Master Mix添加量。综合考虑成本和DNA模板量,最佳ISSR-PCR反应体系(20.0μL):DNA模板10.0 ng、引物0.8μmol/L和2×Taq Master Mix 9.0μL。最佳循环数为35,最佳退火温度为49.6℃。基于上述优化结果,从100条引物中共筛选出42...
【英文摘要】 【Objective】The ISSR-PCR reaction system of Chinese orchids was optimized,and the candidate primers suitable for ISSR analysis in Chinese orchids were screened,which could provide technical reference for the analysis of ISSR molecular markers in auxiliary breeding,genetic relationship and genetic diversity of Chinese orchids.【Method】Six Chinese orchids cultivars were as experimental materials. The leaf samples were collected,then crushed and ground by the mortar grinding method and the grinding instrument me...
【基金】 福建省林业厅种业创新与产业化工程林业项目(ZYCX-LY-2017005); 福建省林业科学研究项目(闽林科[2017]3号)
【更新日期】 2018-09-03
【分类号】 S682.31
【正文快照】 (1Fujian Forestry Science and Technology Test Center,Nanjing,Zhangzhou 363600,China;2Institute of Subtropical Fruit,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350000,China)0引言【研究意义】中国兰又称国兰,是中国传统兰花的统称,为兰科(Orchidaceae)兰属

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