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针对nsp9基因的siRNA在Marc-145细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响

Influence of siRNA targeting nsp9 gene on replication of PRRSV in Marc-145 cells

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【作者】 赵孟孟李华玮何健冯松林张雅张二芹张桂红

【Author】 ZHAO Meng-meng;LI Hua-wei;HE Jian;FENG Song-lin;ZHANG Ya;ZHANG Er-qin;ZHANG Gui-hong;College of Veterinary Medicine and Animal Science,Henan Agricultural University;National Engineering Research Center for Breeing Swine Industry,Key Laboratory of Zoonosis Prevention and Control of Guangdong Province,College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University;Institute of Agricultural Economics and Information,Henan Academy of Agriculture Sciences;

【机构】 河南农业大学牧医工程学院华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室国家生猪种业工程技术研究中心河南牧业经济学院生物工程学院

【摘要】 为了验证猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)nsp9基因对PRRSV的复制影响,化学合成针对nsp9基因的siRNA,转染到Marc-145细胞中,接种PRRSV之后分别通过荧光定量和Western blot方法来测定病毒的滴度变化和表达情况。结果发现,转染siRNA的Marc-145细胞中病毒的滴度低于未转染特定siRNA的对照组,同时N蛋白的mRNA和蛋白水平均低于未转染特定siRNA的对照组。初步得出结论nsp9基因为病毒复制关键基因,针对nsp9基因的siRNA会在Marc-145细胞中抑制PRRSV的复制。

【Abstract】 In order to verify whether nsp9 gene of PRRSV have an influence on the replication of PRRSV,chemical synthesis siRNA special for nsp9 gene was transfected into Marc-145 cells,qPCR and Western blot were conducted to evaluate viral titer and expression after inoculated PRRSV.The results showed that viral titer in the Marc-145 cells transfected with siRNA were lower than that of not transfected cells.Meanwhile,the mRNA and protein level were the same as the titer level.So nsp9 is a crucial gene for viral replication.SiRNA for nsp9 gene could inhibit the replication of PRRSV in Marc-145 cells.

【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp9复制siRNA滴度
【Key words】 PRRSVnsp9replicationsiRNAtiter
【基金】 国家自然科学基金资助项目(31272564);公益性行业(农业)科研专项经费资助项目(201203039);国家生猪现代农业产业技术体系资助项目(CARS-36);河南省高等学校重点科研资助项目(15A230030);“十二五”农村领域国家科技计划课题资助项目;高致病性蓝耳病等重要家畜疫病新型疫苗研究与开发资助项目(2015BAD12B02)
  • 【文献出处】 中国兽医学报 ,Chinese Journal of Veterinary Science , 编辑部邮箱 ,2017年09期
  • 【分类号】S852.651
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】111
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