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【英文篇名】 |
Preparation of probes to detect human enterovirus,enterovirus 71,and coxsackievirus A16 |
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【下载频次】 |
★★★ |
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【作者】 |
倪楠;
韩彬;
侯佩强;
魏希文;
张荣强;
吕静; |
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【英文作者】 |
NI Nan;
HAN Bin;
HOU Pei-qiang;
WEI Xi-wen;
ZHANG Rong-qiang;
LV Jing;
Taian Center for Disease Control and Prevention; |
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【作者单位】 |
泰安市疾病预防控制中心; |
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【文献出处】 |
中国病原生物学杂志
, Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱
2017年 12期
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
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【中文关键词】 |
肠道病毒;
EV71;
COXA16;
基因探针;
分子杂交; |
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【英文关键词】 |
Pan-enterovirus;
EV71;
COXA16;
genetic probes;
molecular hybridization; |
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【摘要】 |
目的制备地高辛标记基因探针,利用分子杂交试验同时检测手足口病患者粪便标本中的肠道病毒(Pan-enterovirus,PE)、肠道病毒71型(Enterovirs 71EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsachie virus,CoxA16)。方法根据GenBank已发表的基因序列,分别在PE、EV71、CoxA16保守区设计3对特异性寡核苷酸引物,进行实时荧光定量PCR检测。从PE、EV71、CoxA16阳性标本中分离病毒,提取RNA,以RT-PCR扩增产物作为基因探针的目的基因,采用随机引物法进行Digxigenin-11-dUTP标记,采用分子杂交试验检测3种基因探针的灵敏性和特异性。结果 RTPCR分别扩增出116、226、208bp目的基因片段,经标记后作为检测PE、EV71、CoxA16的3种高纯度的基因探针,对相应病毒RNA的最低检出限均为1pg,可分别与PE(+)、EV71(+)、CoxA16(+)标本提取的RNA发生特异性杂交,与乙型脑炎病毒、诺如病毒、轮状病毒、H3N2、甲型H1N1流感病毒的核酸无杂交反应。结论制备的PE、EV71及CoxA16基因探针灵敏、特异,操作简单,适用于手... |
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【英文摘要】 |
Objective To use molecular hybridization to prepare DIG-labeled genetic probes for the detection of pan-enterovirus(PE),enterovirus 71(EV71),and coxsackievirus A16(CoxA16)from patients with hand,foot,and mouth disease(HFMD). Methods Based on conserved regions of sequences of PE,EV71,and CoxA16 in the GenBank database,three pairs of primers were designed and used to amplify those conserved regions.Gene probes were labeled with Digoxigenin-11-dUTP using the random primed method.The sensitivity and specificity... |
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【基金】 |
泰安市科学技术发展计划项目(No.201340629) |
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【更新日期】 |
2018-01-18 |
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【分类号】 |
R440;R725.1 |
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【正文快照】 |
手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)是由肠道病毒感染引起的传染病[1-2],近年来发病率呈上升趋势,是威胁婴、幼儿及学龄前儿童健康的主要传染病之一。病原学监测显示,肠道病毒71型(Enterovirs 71,EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox-sachie virus,CoxA16)是手足口病主要病? |
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