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鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpK的原核重组表达与纯化  
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【英文篇名】 Recombinant exression and urification of the OmK outer membrane rotein of Acinetobacter baumannii
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【作者】 郭三君; 任珊; 谢勇恩;
【英文作者】 GUO San-jun; REN San; XIE Yong-en; Institute of Immunology and Molecular Biology; North Sichuan Medical College;
【作者单位】 川北医学院免疫与分子生物学研究所;
【文献出处】 中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2017年 09期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 鲍曼不动杆菌; OmpK; 表达; 纯化;
【英文关键词】 Acinetobacter baumannii; Outer membrane protein K; Expression; Purification;
【摘要】 目的通过分子克隆方法制备重组鲍曼不动杆菌外膜蛋白K(OmpK)并进行纯化,为进一步研究该蛋白的免疫活性奠定基础。方法采用PCR方法扩增鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC19606外膜蛋白K编码基因,将该基因克隆入原核表达载体pColdI,构建重组质粒pColdI/OmpK。将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导表达重组蛋白,通过镍亲和层析柱进行纯化。结果 PCR扩增获得大小约726bp的目的基因片段,将其克隆入原核表达载体pColdI后进行酶切和DNA测序分析,pColdI/OmpK构建正确,重组质粒转化BL21经IPTG诱导后表达目的蛋白(相对分子质量约30×103),经镍亲和纯化得到高纯度的重组OmpK。结论通过分子克隆技术使鲍曼不动杆菌OmpK蛋白在构建的原核表达系统中得到高效表达,并获得了高纯度的重组蛋白,为进一步研究鲍曼不动杆菌OmpK的免疫活性奠定了基础。
【英文摘要】 Objective To use molecular cloning technology to produce recombinant outer membrane protein K(OmpK)of Acinetobacter baumannii in order to provide a basis for further study of the immunological activity of OmpK. Methods PCR was used to amplify the gene coding for OmpK from the ATCC19606 reference strain of A.baumannii,and the gene fragment was cloned into the prokaryotic expression vector pColdI.The recombinant plasmid pColdI/OmpK was transformed into Escherichia coli BL21 cells and its expression was induce...
【基金】 四川省教育厅重点项目(No.17ZA0166)
【更新日期】 2017-10-31
【分类号】 R378
【正文快照】 ***鲍曼不动杆菌为继铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌之后又一常见院内感染病菌,感染对象主要为长期使用广谱抗菌药物和机械通气及长期住院的慢性病患者,在院内容易引起暴发流行,主要引起肺部感染,软组织或伤口感染、插管相关感染、尿路感染、菌血症和继发性脑膜炎等病症。鲍曼不

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