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Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因条件敲低小鼠的基因型鉴定  
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【英文篇名】 Genotype Identification of Mice with Conditional Brg1 Knocking down in Type Ⅱ Alveolar Epithelial Cells
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【作者】 司道祝; 彭单伊; 张荣; 夏耘秋; 牛超; 苟好; 刘姜; 王莉佳; 田代印; 刘恩梅; 邹琳; 符州;
【英文作者】 Si Daozhu; Peng Danyi; Zhang Rong; Xia Yunqiu; Niu Chao; Gou Hao; Liu Jiang; Wang Lijia; Tian Daiyin; Liu Enmei; Zou Lin; Fu Zhou; Department of Pediatric Research Institute; Children's Hospital of Chongqing Medical University; Ministry of Education Key Laboratory of Child Development and Disorders; China International Science and Technology Cooperation Base of Child Development and Critical Disorders; Chongqing Engineering Research Center of Stem Cell Therapy; Xijing Hospital; The First Affiliated Hospital of the Fourth Mil...;
【作者单位】 重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地重庆市干细胞治疗工程技术研究中心; 第四军医大学附属第一医院西京医院; 重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心;
【文献出处】 中国细胞生物学学报 , Chinese Journal of Cell Biology, 编辑部邮箱 2017年 03期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 Brg1; Ⅱ型肺泡上皮细胞; 基因敲低; 基因型;
【英文关键词】 Brg1; type Ⅱ alveolar epithelial cells; gene knock-down; genotype;
【摘要】 该文旨在鉴定特异敲低Ⅱ型肺泡上皮细胞中Brg1(Brahma-related gene 1)基因小鼠的基因型,为进一步研究Brg1在肺相关疾病中的作用奠定基础。将两对转基因小鼠Brg1fl/fl和SP-C-rt TA/(tet O)7-Cre进行繁殖交配,将得到纯合子、杂合子及野生型3种基因型。出生后1周龄剪尾提取基因组DNA,PCR法判定基因型。用多西环素诱导法诱导(tet O)7-Cre重组酶活性,靶向剪切Ⅱ型肺泡上皮细胞上Brg1基因,磁珠分选法提取小鼠原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,通过观察细胞生长特征、检测pro SP-C表达鉴定原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,RT-PCR法、Western blot检测Brg1表达水平。结果显示,成功繁殖了Brg1纯合子小鼠,通过磁珠分选法成功分离了原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,用多西环素诱导法成功敲低了Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因。该结果为相关研究提供动物模型奠定了基础。
【英文摘要】 The purpose of this study was to identify the genotype of knocking down of Brg1(Brahmarelated gene1) gene in type Ⅱ alveolar epithelial cells(AEC2s) in mice, and to lay a foundation for further study on the role of Brg1 in lung related diseases. Two pairs of transgenic mice, Brg1fl/fland SP-C-rt TA/(tet O)7-Cre, were introduced to breed and mated, and homozygous(SP-C-rt TA/(tet O)7-Cre/Brg1fl/fl), heterozygous(SP-Crt TA/(tet O)7-Cre/Brg1fl/–) and wild-type genotypes were obtained. Genomic DNA was extracted ...
【基金】 重庆市科技委员会重大专项(批准号:Cstc2014yykfC10003)资助的课题~~
【更新日期】 2017-04-21
【分类号】 R563
【正文快照】 重庆市科技委员会重大专项(批准号:Cstc2014yykf C10003)资助的课题网络出版时间:2017-02-23 17:09:28 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20170223.1709.004.html肺泡是肺进行气体交换的基本单位,其表面覆盖的单层肺泡上皮主要由I型和II型肺泡上皮细胞(Type II a

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