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CD20片段抗体在红花悬浮细胞中的表达研究  
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【英文篇名】 Expression of CD20 antibody fragment in safflower suspension cells
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【作者】 王立勇; 刘秀明; 张玲; 姚娜; 王德仲; 历雯清; 蔡静波; 李海燕; 姜潮;
【英文作者】 WANG Liyong; LIU Xiuming; ZHANG Ling; YAO Na; WANG Dezhong; LI Wenqing; CAI Jingbo; LI Haiyan; JIANG Chao; Ministry of Education Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development; College of Traditional Chinese Medicine; Jilin Agricultural University;
【作者单位】 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心; 吉林农业大学中药材学院;
【文献出处】 西北农林科技大学学报(自然科学版) , Journal of Northwest A & F University(Natural Science Edition), 编辑部邮箱 2017年 12期  
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【中文关键词】 红花愈伤组织; 悬浮细胞; 农杆菌介导; 表达载体; CD20复合片段抗体;
【英文关键词】 safflower callus; suspension cells; agrobacterium-mediated transformation; expression vectors; CD20 complex antibody fragment;
【摘要】 【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索不同初始接种量、蔗糖质量分数、水解酪蛋白质量浓度对红花悬浮细胞生长的影响。将CD20复合片段抗体基因两端引入XmaⅠ/EcoRⅠ酶切位点,并将其与pEASY-T1和pBasta载体相连,构建pEASY-T1-CD20克隆载体和pBasta-CD20表达载体,再将构建的pBasta-CD20表达载体转入根瘤农杆菌,利用根瘤农杆菌介导红花悬浮细胞转化法表达CD20复合片段抗体。【结果】红花子叶愈伤诱导最佳条件为MS+NAA 2mg/L+6-BA 0.5mg/L、温度(25±0.1)℃、光照70μmol/(m2·s)连续光照,继代培养条件为MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、30μmol/(m2·s)连续光照、温度(25±0.1)℃。悬浮细胞体系培养最佳条件为不加琼脂粉的MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、接种量2.5g(50mL培养基)、蔗糖质量分数2%、水解酪...
【英文摘要】 【Objective】This study aimed to investigate the culture conditions for suspension cell system established by safflower callus and the expression of CD20 complex fragment antibody by agrobacteriummediated transformation in safflower suspension cells.【Method】The safflower cotyledon was used as explants for callus induction to research the effects of different hormone combinations on callus induction.High quality callus were selected to explore the effects of different initial inoculation amounts,sucrose concen...
【基金】 “十二五”国家高新技术研究与发展计划项目(2011AA100606); 吉林省科技厅项目(20150623024TC-11); 国家自然科学基金项目(31101172,31501366)
【更新日期】 2017-12-27
【分类号】 S567.219
【正文快照】 红花(Carthamus tinctorius L.),又名草红花、红蓝花、刺红花,是菊科(Asteraceae)红花属(Carthamus L.Herb.)的1年生草本植物,具特异香气,味微苦;以花片长、色鲜红、质柔软者为佳,主产河南、浙江、四川等地;具有活血通经、去瘀止痛等功效[1-3]。目前,红花已经成为最重要的双子?

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