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中国南瓜内参基因18S rRNA的克隆及其引物开发  
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【英文篇名】 Cloning of 18S rRNA gene from Cucurbita moschata and development of its primers
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【作者】 朱海生; 王彬; 陈敏氡; 李永平; 张前荣; 刘建汀; 李大忠; 吴卫东; 温庆放;
【英文作者】 ZHU Haisheng; WANG Bin; CHEN Mindong; LI Yongping; ZHANG Qianrong; LIU Jianting; LI Dazhong; WU Weidong; WEN Qingfang; Crops Research Institute; Fujian Academy of Agricultural Sciences; Vegetable Research Center; Fujian Engineering Research Center for Vegetables; Planting Technology Extension Station of Fujian Province;
【作者单位】 福建省农业科学院作物研究所; 福建省农业科学院蔬菜研究中心; 福建省蔬菜工程技术研究中心; 福建省种植业技术推广总站;
【文献出处】 西北农林科技大学学报(自然科学版) , Journal of Northwest A & F University(Natural Science Edition), 编辑部邮箱 2017年 03期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 中国南瓜; 18S rRNA; 内参基因; 实时荧光定量PCR;
【英文关键词】 Cucurbita moschata; 18S rRNA; reference gene; real time PCR;
【摘要】 【目的】克隆获得中国南瓜18SrRNA,并设计合适的荧光定量PCR内参,为开展中国南瓜重要功能基因的表达模式和调控机制研究奠定基础。【方法】以中国南瓜‘密本’品种的基因组DNA为模板,通过PCR方法克隆中国南瓜18SrRNA基因序列,再利用Primer Premier软件设计荧光定量PCR引物,对该内参基因在中国南瓜不同组织、生长阶段及非生物胁迫条件下的表达稳定性进行检测。【结果】首次克隆得到中国南瓜18SrRNA基因序列,其长度为1 857bp,GenBank登录号为KM979454,该基因与西瓜、西葫芦等瓜类蔬菜18SrRNA基因同源性大都在90%以上;以中国南瓜内参基因18SrRNA核苷酸全长序列为基础设计1对荧光定量PCR引物,以中国南瓜果肉总RNA逆转录的cDNA第一链为模板进行PCR扩增,该引物扩增的片段大小为132bp,扩增效率高,特异性强;18SrRNA基因在中国南瓜不同组织、生长发育阶段及非生物胁迫条件下均能稳定表达。【结论】克隆获得中国南瓜18SrRNA基因,该基因适合在中国南瓜基因表达研究中作为内参基因。
【英文摘要】 【Objective】The study cloned 18 SrRNA gene of Cucurbita moschata and designed suitable qRT-PCR primers for analyzing expression patterns and regulation mechanisms of important critical genes.【Method】Sequence of 18 SrRNA gene was cloned by PCR using the genomic DNA of Cucurbitamoschata cultivar‘Miben'as template.A pair of qRT-PCR primers were then designed by Primer Premier software.Furthermore,the stability of 18 SrRNA gene was determined in Cucurbita moschata in different tissues,growth stages and abiotic s...
【基金】 福建省属公益类科研院所基本科研专项(2015R1026-3); 福建省农业科学院创新团队PI项目(2016PI-40); 福建省自然科学基金项目(2015J01118)
【更新日期】 2017-03-21
【分类号】 S642.1
【正文快照】 中国南瓜(Cucurbita moschata Duch.)为葫芦科(Cucurbitaceae)南瓜属(Cucurbita spp.)一年生蔓生草本植物,起源于美洲大陆,16世纪初由欧洲人传入亚洲后,于16世纪中叶经东南亚传入中国东南沿海,然后传遍中国内地并成为我国人民喜爱的传统蔬菜,具有适应性强、分布地域广、种类繁?

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