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地中海富盐菌PhaE蛋白乙酰化修饰对其功能的影响  
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【英文篇名】 Acetylation regulates the function of PhaE in Haloferax mediterranei
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【作者】 姜雄健; 王前; 刘桂明; 赵大贺; 刘景芳; 向华;
【英文作者】 Xiongjian Jiang; Qian Wang; Guiming Liu; Dahe Zhao; Jingfang Liu; Hua Xiang; State Key Laboratory of Microbial Resources; Institute of Microbiology; Chinese Academy of Sciences; College of Life Sciences; University of Chinese Academy of Sciences;
【作者单位】 中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室; 中国科学院大学生命科学学院;
【文献出处】 微生物学报 , Acta Microbiologica Sinica, 编辑部邮箱 2017年 11期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 乙酰化; PHA合酶; PhaE; 突变; 嗜盐古菌;
【英文关键词】 acetylation; PHA synthase; PhaE; mutation; Haloarchaea;
【摘要】 【目的】研究地中海富盐菌PHA合酶(Pha EC)中Pha E亚基乙酰化修饰对其功能的影响,探讨乙酰化修饰对菌体生理代谢的调控作用。【方法】蔗糖密度梯度离心收集PHA颗粒,质谱鉴定颗粒结合蛋白Pha E的乙酰化位点。将乙酰化位点(赖氨酸,K)分别突变为精氨酸(R)(模拟去乙酰化)或谷氨酰胺(Q)(模拟乙酰化),利用同源双交换原理,将突变后的基因原位敲入基因组。以野生型为对照,检测突变对菌体生长、葡萄糖消耗和PHA合成能力的影响。利用Western blot检测PHA颗粒上Pha E的含量,进一步分析乙酰化修饰对蛋白功能的影响。【结果】在Pha E蛋白105位和170位赖氨酸(K)2个位点检测到乙酰化修饰。利用遗传操作系统将突变的基因原位敲入,共得到6种突变株。发酵结果表明,任何一种单突变对菌体生长及PHA合成的影响均不明显。但当2个位点同时突变成精氨酸(K105R/K170R)时,突变株生长及合成PHA的能力均受到明显抑制,2个位点同时突变成谷氨酰胺(K105Q/K170Q)则无明显影响。进一步的Western blot结果表明,突变成精氨酸的双突变株的PHA颗粒上,Pha E蛋白的含量相较于野生型约降低了一...
【英文摘要】 [Objective] The purpose of this study is to study the acetylation of Pha E, one subunit of polyhydroxyalkanoate(PHA) synthase(Pha EC), and its function in PHA biosynthesis in Haloferax mediterranei. [Methods] PHA granules were collected by sucrose density gradient centrifugation. The acetylated sites of Pha E were identified by LC-MS/MS. The acetylated lysine(K) sites were mutated to arginine(R, mimics deacetylation) or glutamine(Q, mimics acetylation), and the mutated gene was knocked into the chromosome o...
【基金】 国家自然科学基金(31330001); 食品科学与工程浙江省重中之重一级学科开放基金(YTsp20142014)~~
【更新日期】 2017-11-16
【分类号】 Q93
【正文快照】 蛋白质翻译后修饰,是指m RNA被翻译成蛋www.uniprot.org/docs/ptmlist),随着技术进步,越白质后,蛋白质上个别氨基酸残基被共价修饰的来越多的修饰种类被发现。其中研究较多的包括过程。它使蛋白质的结构更为复杂,功能更为完磷酸化、甲基化、泛素化、糖基化、乙酰化、琥善,调节?

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