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【英文篇名】 |
Preparation and characterization of monoclonal antibody against GⅡ.17 type norovirus |
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【下载频次】 |
★★★★ |
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【作者】 |
潘俊杰;
张坤明;
潘勇兵;
张囡;
闭兰; |
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【英文作者】 |
PAN Jun-jie;
ZHANG Kun-ming;
PAN Yong-bing;
ZHANG Nan;
BI Lan;
Wuhan Institute of Biological Products Co.;
Ltd.; |
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【作者单位】 |
武汉生物制品研究所有限责任公司; |
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【文献出处】 |
中国生物制品学杂志
, Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱
2017年 11期
期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
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【中文关键词】 |
GⅡ.17型诺如病毒;
单克隆抗体; |
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【英文关键词】 |
GⅡ;
17 type norovirus;
Monoclonal antibody; |
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【摘要】 |
目的制备抗GⅡ.17型诺如病毒(noroviruses,No V)单克隆抗体,并鉴定其生物学特性。方法将小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0与经GⅡ.17 No V VLPs抗原免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,通过替代性的中和试验筛选出阳性杂交瘤细胞,制备单克隆抗体并进行纯化,ELISA法检测单克隆抗体效价,SDS-PAGE法检测单克隆抗体纯度,BCA法检测单克隆抗体浓度,Biacore法检测单克隆抗体亲和力,亚型试剂鉴定单克隆抗体亚型,并进行各单克隆抗体与不同型NOV VLPs-唾液人类组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)的交叉中和试验,单抗与不同型NOV VLPs结合能力的Western blot鉴定。结果筛选出3株具有中和活性的细胞株,分别命名为E12、B7、H7,纯化后的3株单克隆抗体效价均在106以上,浓度分别为6.932、2.662和2.371 mg/ml,亲和力常数KD均为10-9 mol/L,单克隆抗体E12的纯度在93%以上,属于Ig G2a亚型,单克隆抗体B7和H7的纯度分别在98%以上,属于Ig G1亚型。3株单克隆抗体仅对GⅡ.17型No V具有中... |
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【英文摘要】 |
Objective To prepare and characterize the monoclonal antibody(Mc Ab) against G Ⅱ.17 type norovirus(No V). Methods Mouse myeloma cells SP2/0 were fused with the spleen cells of BALB/c mice immunized with the virus-like particles(VLPs) of GⅡ.17 type No V, and positive hybridoma cells were screened by alternative neutralization test. The prepared Mc Ab was purified and determined for titer by ELISA, for purity by SDS-PAGE, for concentration by BCA method, for affinity by Biacore method, and analyzed for subtyp... |
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【更新日期】 |
2017-11-28 |
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【分类号】 |
R392-33 |
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【正文快照】 |
诺如病毒(noroviruses,No V)属于杯状病毒,为单股正链RNA病毒。No V是引起急性腹泻的主要病原体,可感染各个年龄阶段的人群,尤其是儿童和
老年人,其主要传播途径是人与人之间的口粪传播,常通过污染的食物及污水造成人群密集地方的集体暴发[1-3]。据报道,每年由No V引起儿童(<5 |
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