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【英文篇名】 |
Prokaryotic expression and immunogenicity of adenovirus antigenic epitope chimeric protein |
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【下载频次】 |
★★★★★ |
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【作者】 |
王新国;
齐永;
潘英;
李素芹;
李佳萌;
陈红霞;
李素梅;
陈晨;
徐艺菲;
张玉彬;
李越希; |
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【英文作者】 |
WANG Xin-guo;
QI Yong;
PAN Ying;
LI Su-qin;
LI Jia-meng;
CHEN Hong-xia;
LI Su-mei;
CHEN Chen;
XU Yi-fei;
ZHANG Yu-bin;
LI Yue-xi;
Huadong Research Institute for Medicine and Biotechniques; |
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【作者单位】 |
南京军区军事医学研究所;
中国药科大学生命科学与技术学院;
南京医科大学基础医学院; |
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【文献出处】 |
中国生物制品学杂志
, Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱
2017年 07期
期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
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【中文关键词】 |
人腺病毒;
抗原表位;
嵌合蛋白;
抗原性;
免疫原性; |
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【英文关键词】 |
Human adenovirus(HAdV);
Antigenic epitope;
Chimeric protein;
Antigenicity;
Immunogenicity; |
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【摘要】 |
目的设计含有人腺病毒(human adenovirus,HAd V)3、7、11、14及55型抗原表位的嵌合蛋白,利用大肠埃希菌进行原核表达,并检测其抗原性及免疫原性。方法对5种型别HAd V的六邻体蛋白氨基酸序列进行分析,筛选出其中具有强抗原性的片段,片段之间用2个甘氨酸和1个丝氨酸进行连接,形成1个多抗原片段串联的嵌合蛋白。优化嵌合蛋白的基因序列并化学合成全长基因,克隆至原核表达载体p ET28a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),筛选高表达嵌合蛋白的工程菌。用High Affinity Ni-NTA resin纯化该嵌合蛋白,并将其作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,间接ELISA法检测嵌合蛋白的抗原性及免疫原性。结果成功构建了高表达嵌合蛋白的工程菌,表达的嵌合蛋白相对分子质量约55 000,表达量达95%;破菌上清中嵌合蛋白的纯度较高,纯化后纯度在90%以上。嵌合蛋白免疫小鼠4次后,小鼠抗血清效价达1∶320 000。制备的腺病毒抗原表位嵌合蛋白能有效检测血清中腺病毒3、7、11、14及55型抗体,且能有效刺激机体产生针对各型别腺病毒抗原表位的抗体。结论表达制备的包含5种型别HAd V... |
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【英文摘要】 |
Objective To construct a chimeric protein of antigenic epitopes from human adenovirus(HAd V) of types 3,7, 11, 14 and 55, express in E. coli and determine its antigenicity and immunogenicity. Methods The amino acid sequences of HAd V hexons of five types were analyzed by using the software ANTHEWIN, from which the epitopes with strong antigenicity were screened and linked together with Gly-Gly-Ser for construction of a chimeric protein. The gene sequence of the chimeric protein was optimized, synthesized ch... |
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【基金】 |
国家重大新药创制课题(2015ZX09J15105-001-003) |
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【更新日期】 |
2017-07-26 |
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【分类号】 |
R392 |
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【正文快照】 |
人腺病毒(human adenovirus,HAd V)属于腺病毒科,哺乳动物腺病毒属,最早由ROWE等[1]于1953年从人扁桃腺样组织中分离得到,目前已确定的基因型别达7种68个[2]。HAd V是一种呈二十面体的具有线性双链DNA的病毒,由核心蛋白、DNA及蛋白衣壳构成。研究发现,腺病毒蛋白衣壳由五邻体、 |
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