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一种siRNA药物载体薄膜的稳定性与基因沉默效应评价  
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【英文篇名】 Stability and gene silencing effect of a siRNA delivery symstem
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【作者】 吴丽娟; 赵芳; 刘光万; 曲洪媛; 杨旭霞; 廖囡囡; 陈丽; 杨光; 吴昌琳;
【英文作者】 WU Li-juan; ZHAO Fang; LIU Guang-wan; QU Hong-yuan; YANG Xu-xia; LIAO Nan-nan; CHEN li; YANG Guang; WU Chang-lin; Shanghai Key Laboratory of Magnetic Resonance; Physics Department; East China Normal University;
【作者单位】 华东师范大学物理系上海磁共振重点实验室; 苏州博创康源生物技术有限公司;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2017年 04期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 siRNA递送; 层层自组装; 壳聚糖-透明质酸-siRNA多层薄膜; 基因沉默效应;
【英文关键词】 siRNA delivery; Layer-by-layer self-assembly(LBL); Chitosan-hyaluronic acid-siRNA multilayer films; Gene silencing effect;
【摘要】 目的分析一种siRNA药物载体薄膜在溶液中的稳定性,并评价其基因沉默效应。方法利用层层自组装(layer-by-layer self-assembly,LBL)技术制备壳聚糖(chitosan,CHS)-透明质酸(hyaluronic acid,HA)-siRNA多层薄膜。通过UV-vis吸光度法对siRNA在薄膜上的生长过程以及在不同缓释液中的稳定性分别进行验证。结合荧光图像和流式细胞术,采用直接与细胞接触的方式检测该siRNA载体薄膜的HEK293T细胞转染效应。结果 CHS-HA-siRNA多层薄膜在260 nm处有很强的吸收峰,且随着含siRNA的组装层数的增加,在260 nm的吸光度值越大。该siRNA载体薄膜在1 mol/L NaCl溶液中释放效果最好,在pH 7.4的PBS缓冲液中次之,在纯水中稳定性最好。过低或过高的盐离子浓度对促进薄膜的崩解无优势。阳性对照组7-eGFP-siRNA和2-eGFP-siRNA具有较好的沉默绿色荧光蛋白基因的效应;在细胞培养2 d后的转染试验中,阳性对照组7-eGFP-siRNA较2-eGFP-siRNA组显示出更强的基因沉默效应。结论成功构建了一种非病毒siR...
【英文摘要】 Objective To analyze the stability of a siRNA delivery system in solution and evaluate its gene silencing effect. Methods Chitosan(CHS)-Hyaluronic acid(HA)-siRNA multilayer films were prepared through layer-by-layer self-assembly(LBL). Both the construction and the disassembly process of siRNA-loaded films were verified by UV-vis spectroscopy. Additionally, the biological gene silencing effect of the siRNA delivery system in eGFP-HEK 293 T cells was evaluated via flow cytometry and Olympus fluorescence imag...
【更新日期】 2017-05-08
【分类号】 R927
【正文快照】 当前,如何提高siR NA药物在人体内的稳定性1.3主要试剂及仪器壳聚糖(DD>90%,相对分及靶向性,如进其通过细胞内吞作用被靶细胞摄取,子质量40 000)和HA(相对分子质量120 000)均购开发其局部给药方式,克服全身给药带来的siR NA用自上海翊圣生物科技有限公司;氯化钠、盐酸、氢量大?

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