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海洋金属蛋白酶MP仿生亲和材料纯化条件的优化  
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【英文篇名】 Optimization of purification protocol of biomimetic affinity material for marine metalloprotease MP
【下载频次】 ★★
【作者】 杨娟; 李尚勇; 马子宾; 刘均忠; 郝建华; 王跃军; 孙谧;
【英文作者】 YANG Juan; LI Shang-yong; MA Zi-bin; LIU Jun-zhong; HAO Jian-hua; WANG Yue-jun; SUN Mi; Yellow Sea Fisheries Research Institute; Chinese Academy of Fishery Sciences; Laboratory for Marine Drugs and Bioproducts of Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology; College of Food Sciences&Technology; Shanghai Ocean University;
【作者单位】 中国水产科学研究院黄海水产研究所; 海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室; 上海海洋大学食品学院;
【文献出处】 食品工业科技 , Science and Technology of Food Industry, 编辑部邮箱 2017年 15期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 金属蛋白酶MP; 亲和层析; 纯化;
【英文关键词】 Metalloproteinase MP; affinity chromatography; purification;
【摘要】 目的:建立一种高效的海洋金属蛋白酶MP仿生亲和纯化方法。方法:采用硼酸仿生亲和材料,利用单因素实验,Plackett-Burman实验设计、Box-Behnken实验等响应面优化法,对纯化条件进行优化,利用SDS-PAGE及HPLC分析纯化后样品纯度。结果:利用单因素法和响应面法对纯化条件进行优化和分析,获得硼酸琼脂糖凝胶亲和柱的最佳纯化条件为:粗酶液浓度在100 mg/m L,上样缓冲液为p H8.6的甘氨酸-氢氧化钠,上样速度1 m L/min,洗脱缓冲液为p H5.2的磷酸氢二钠-柠檬酸,洗脱速度2 m L/min,洗脱缓冲液加入75 mmol/L的甘露醇时纯化效果最好,纯化效率提高了11倍,纯化后的样品纯度达到98.8%。
【英文摘要】 Objective: To establish an efficient method for biomimetic affinity purification of marine metalloprotease MP.Methods: Using the biomimetic affinity materials to optimize the purification conditions by response surface optimization method,such as the single factor experiment,Plackett-Burman experiment design,Box-Behnken experiment.And the purity of purified samples by SDS-PAGE and HPLC was analyzed. Results: The purification conditions were optimized by single factor experiment and the response surface desi...
【基金】 NSFC-山东联合资助海洋研究中心项目(U1406402-5); 国际科技合作与交流专项(2014DFG30890); 国家实验室-鳌山科技计划(2015ASKJ02-06); 国家自然科学基金(41376175); 国家863计划(2014AA093516)
【更新日期】 2017-08-29
【分类号】 Q814
【正文快照】 蛋白酶是一类可催化蛋白质或肽类的肽键水解的酶类,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。蛋白酶是继淀粉酶之后成为新一种在全世界广泛应用的酶制剂,全球蛋白酶销售额可占到整个酶工业总产值的60%以上[1]。蛋白酶与人类密切相关,涉及到生活的各个方面。可用于洗涤剂

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